遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2011年
3期
262-269
,共8页
徐丽华%常玉梅%刘春雷%梁利群%刘金亮%池炳杰
徐麗華%常玉梅%劉春雷%樑利群%劉金亮%池炳傑
서려화%상옥매%류춘뢰%량리군%류금량%지병걸
鲤%脑组织cDNA%低温%候选基因%实时荧光定量PCR%双标准曲线法
鯉%腦組織cDNA%低溫%候選基因%實時熒光定量PCR%雙標準麯線法
리%뇌조직cDNA%저온%후선기인%실시형광정량PCR%쌍표준곡선법
采用双标准曲线相对实时荧光定量PCR法,分别以23℃常温对照组和6℃低温待测组的黑龙江鲤脑组织cDNA为模板,以18S rRNA为内参基因,检测26个候选基因的相对表达量.实验数据经显著性分析发现,有5个候选基因在低温条件下表达量显著上升(P<0.01),与对照组相比它们的表达量分别上升了2.11倍、13.9倍、2.52倍、7.38倍和1.83倍,基因功能比对结果表明其编码蛋白产物分别是脂肪酸链延伸蛋白、酰基辅酶A脱氢酶、转录起始因子IIB、肌醇-1-磷酸合成酶、血脑屏障HT7抗原;有7个候选基因在低温下表达量分别下降了21.8%、25.9%、16.6%、23.7%、15.8%、16.3%、42.5%,但对照组和待测组差异不显著(P>O.05),基因功能比对发现它们主要参与抑制糖酵解,促进细胞凋亡和干扰神经系统的重塑活动.上述低温下表达量显著上升的5个冷诱导候选基因的获得为今后进行不耐低温鱼类的基因工程育种提供了基因元件.
採用雙標準麯線相對實時熒光定量PCR法,分彆以23℃常溫對照組和6℃低溫待測組的黑龍江鯉腦組織cDNA為模闆,以18S rRNA為內參基因,檢測26箇候選基因的相對錶達量.實驗數據經顯著性分析髮現,有5箇候選基因在低溫條件下錶達量顯著上升(P<0.01),與對照組相比它們的錶達量分彆上升瞭2.11倍、13.9倍、2.52倍、7.38倍和1.83倍,基因功能比對結果錶明其編碼蛋白產物分彆是脂肪痠鏈延伸蛋白、酰基輔酶A脫氫酶、轉錄起始因子IIB、肌醇-1-燐痠閤成酶、血腦屏障HT7抗原;有7箇候選基因在低溫下錶達量分彆下降瞭21.8%、25.9%、16.6%、23.7%、15.8%、16.3%、42.5%,但對照組和待測組差異不顯著(P>O.05),基因功能比對髮現它們主要參與抑製糖酵解,促進細胞凋亡和榦擾神經繫統的重塑活動.上述低溫下錶達量顯著上升的5箇冷誘導候選基因的穫得為今後進行不耐低溫魚類的基因工程育種提供瞭基因元件.
채용쌍표준곡선상대실시형광정량PCR법,분별이23℃상온대조조화6℃저온대측조적흑룡강리뇌조직cDNA위모판,이18S rRNA위내삼기인,검측26개후선기인적상대표체량.실험수거경현저성분석발현,유5개후선기인재저온조건하표체량현저상승(P<0.01),여대조조상비타문적표체량분별상승료2.11배、13.9배、2.52배、7.38배화1.83배,기인공능비대결과표명기편마단백산물분별시지방산련연신단백、선기보매A탈경매、전록기시인자IIB、기순-1-린산합성매、혈뇌병장HT7항원;유7개후선기인재저온하표체량분별하강료21.8%、25.9%、16.6%、23.7%、15.8%、16.3%、42.5%,단대조조화대측조차이불현저(P>O.05),기인공능비대발현타문주요삼여억제당효해,촉진세포조망화간우신경계통적중소활동.상술저온하표체량현저상승적5개랭유도후선기인적획득위금후진행불내저온어류적기인공정육충제공료기인원건.