遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2007年
7期
874-880
,共7页
短小芽孢杆菌%枯草芽孢杆菌%碱性蛋白酶%基因启动子%基因表达
短小芽孢桿菌%枯草芽孢桿菌%堿性蛋白酶%基因啟動子%基因錶達
단소아포간균%고초아포간균%감성단백매%기인계동자%기인표체
利用TAIL-PCR(Thermal asymmetric interlaced PCR)从短小芽孢杆菌基因组中扩增到碱性蛋白酶基因编码区上游的启动子片段.对该片段的序列测定和分析表明,此片段长797bp,但与基因表达有关的序列长约390bp.对启动子片段进行不同长度的缺失突变,以获得最小的基因启动子片段,结果表明,该基因起始密码子上游约160bp的DNA片段就可以启动基因的表达.将含有该片段的碱性蛋白酶基因WApQ3插入大肠杆菌-芽孢杆菌穿梭质粒载体pSUGV4中,构建了碱性蛋白酶基因表达质粒pSUBpWApQ3.将该质粒分别转入枯草芽孢杆菌和短小芽孢杆菌中表达,可在胞外检测到碱性蛋白酶活性,最高酶活分别为466.5 U/mL和3060 U/mL.
利用TAIL-PCR(Thermal asymmetric interlaced PCR)從短小芽孢桿菌基因組中擴增到堿性蛋白酶基因編碼區上遊的啟動子片段.對該片段的序列測定和分析錶明,此片段長797bp,但與基因錶達有關的序列長約390bp.對啟動子片段進行不同長度的缺失突變,以穫得最小的基因啟動子片段,結果錶明,該基因起始密碼子上遊約160bp的DNA片段就可以啟動基因的錶達.將含有該片段的堿性蛋白酶基因WApQ3插入大腸桿菌-芽孢桿菌穿梭質粒載體pSUGV4中,構建瞭堿性蛋白酶基因錶達質粒pSUBpWApQ3.將該質粒分彆轉入枯草芽孢桿菌和短小芽孢桿菌中錶達,可在胞外檢測到堿性蛋白酶活性,最高酶活分彆為466.5 U/mL和3060 U/mL.
이용TAIL-PCR(Thermal asymmetric interlaced PCR)종단소아포간균기인조중확증도감성단백매기인편마구상유적계동자편단.대해편단적서렬측정화분석표명,차편단장797bp,단여기인표체유관적서렬장약390bp.대계동자편단진행불동장도적결실돌변,이획득최소적기인계동자편단,결과표명,해기인기시밀마자상유약160bp적DNA편단취가이계동기인적표체.장함유해편단적감성단백매기인WApQ3삽입대장간균-아포간균천사질립재체pSUGV4중,구건료감성단백매기인표체질립pSUBpWApQ3.장해질립분별전입고초아포간균화단소아포간균중표체,가재포외검측도감성단백매활성,최고매활분별위466.5 U/mL화3060 U/mL.
