遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2009年
8期
859-864
,共6页
甘薯%谷胱甘肽.-S-转移酶%基因表达%冷胁迫%重金属诱导%RT-PCR%蛋白质印迹
甘藷%穀胱甘肽.-S-轉移酶%基因錶達%冷脅迫%重金屬誘導%RT-PCR%蛋白質印跡
감서%곡광감태.-S-전이매%기인표체%랭협박%중금속유도%RT-PCR%단백질인적
成功地构建了甘薯谷胱甘肽-S-转移酶基因IBGSTU1的原核表达质粒pET-IbGST,并在大肠杆菌BL2I(DE3)中进行IPTG诱导表达.重组蛋白部分以包涵体形式存在,部分以可溶性蛋白形式存在.酶活性测定表明可溶的重组蛋白具有GST的活性.纯化的重组蛋白质用于多克隆抗体的制备.半定量RT-PCR和Western blotting分析结果显示,在正常的生长条件下,甘薯组织不启动IBGSTU1基因的转录和翻译,但是在冷胁迫或重金属离子等的作用下,可以检测到该基因的mRNA和编码的蛋白质,表明该基因在甘薯的胁迫耐受中行使重要功能,并发现该基因的表达具有组织特异性.
成功地構建瞭甘藷穀胱甘肽-S-轉移酶基因IBGSTU1的原覈錶達質粒pET-IbGST,併在大腸桿菌BL2I(DE3)中進行IPTG誘導錶達.重組蛋白部分以包涵體形式存在,部分以可溶性蛋白形式存在.酶活性測定錶明可溶的重組蛋白具有GST的活性.純化的重組蛋白質用于多剋隆抗體的製備.半定量RT-PCR和Western blotting分析結果顯示,在正常的生長條件下,甘藷組織不啟動IBGSTU1基因的轉錄和翻譯,但是在冷脅迫或重金屬離子等的作用下,可以檢測到該基因的mRNA和編碼的蛋白質,錶明該基因在甘藷的脅迫耐受中行使重要功能,併髮現該基因的錶達具有組織特異性.
성공지구건료감서곡광감태-S-전이매기인IBGSTU1적원핵표체질립pET-IbGST,병재대장간균BL2I(DE3)중진행IPTG유도표체.중조단백부분이포함체형식존재,부분이가용성단백형식존재.매활성측정표명가용적중조단백구유GST적활성.순화적중조단백질용우다극륭항체적제비.반정량RT-PCR화Western blotting분석결과현시,재정상적생장조건하,감서조직불계동IBGSTU1기인적전록화번역,단시재랭협박혹중금속리자등적작용하,가이검측도해기인적mRNA화편마적단백질,표명해기인재감서적협박내수중행사중요공능,병발현해기인적표체구유조직특이성.
