CAJ | 학술논문

为了研究骨桥蛋白基因(OPN)在奶山(Capra hircus)乳腺组织不同泌乳期的变化规律及其功能,采用SYBR Green染料建立该基因的实时荧光定量PCR(QPCR)分析方法,以β-acan基因为内参,对该基因在乳腺组织泌乳28d、60d、100d、190d、270d和330 d的mRNA表达水平进行检测:同时将该基因片段克隆到真核表达载体pcDNA3.1,构建重组质粒pcDNA3.1.OPN,所获重组质粒经过酶切和测序鉴定后.转染MCF-7细胞,采用MTT(四唑盐,3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5.di.phenytetrazoliumromid)法检测OPN对MCF-7细胞的增殖差异,结果表明:OPN基因在泌乳初期(28 d)和泌乳后期(190 d)表达水平较高,干奶期最低,其表达水平总体呈现高.低.高.低的变化模式.MTT实验表明转染OPN基因的MCF.7细胞较未转染基因组细胞的生长具有显著差异(P<0.05),说明OPN的表达具有促进MCF-7细胞生长的作用.
위료연구골교단백기인(OPN)재내산(Capra hircus)유선조직불동비유기적변화규률급기공능,채용SYBR Green염료건립해기인적실시형광정량PCR(QPCR)분석방법,이β-acan기인위내삼,대해기인재유선조직비유28d、60d、100d、190d、270d화330 d적mRNA표체수평진행검측:동시장해기인편단극륭도진핵표체재체pcDNA3.1,구건중조질립pcDNA3.1.OPN,소획중조질립경과매절화측서감정후.전염MCF-7세포,채용MTT(사서염,3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5.di.phenytetrazoliumromid)법검측OPN대MCF-7세포적증식차이,결과표명:OPN기인재비유초기(28 d)화비유후기(190 d)표체수평교고,간내기최저,기표체수평총체정현고.저.고.저적변화모식.MTT실험표명전염OPN기인적MCF.7세포교미전염기인조세포적생장구유현저차이(P<0.05),설명OPN적표체구유촉진MCF-7세포생장적작용.