遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2004年
5期
594-598
,共5页
序列特异性引物-PCR%人类血小板抗原%基因分型
序列特異性引物-PCR%人類血小闆抗原%基因分型
서렬특이성인물-PCR%인류혈소판항원%기인분형
为研究采用PCR-SSP技术,建立可靠的人类血小板抗原HPA-1,2,3,4,5,6系统的同步基因分型方法,并以所建立的方法研究血小板抗原.设计合成18条序列特异性引物,探索最佳退火温度,通过调整引物浓度、Mg2+离子浓度,使HPA-1～6系统等位基因在同一条件下进行同步扩增和扩增产物在同一凝胶中进行同步电泳.引物的特异性和灵敏度采用基因型已知的质控DNA进行验证.应用此方法,对2000年度国际输血协会(ISBT)第十届血小板基因定型与血清学工作组送检的15份考核样本(其中血样2份,DNA样本13份)进行了基因分型.用此方法检测质控DNA,结果与已知的HPA基因型完全相符;15份第十届血小板基因定型与血清学工作组的考核样本的检测结果,与ISBT公布的结果完全相同,准确率达100%.
為研究採用PCR-SSP技術,建立可靠的人類血小闆抗原HPA-1,2,3,4,5,6繫統的同步基因分型方法,併以所建立的方法研究血小闆抗原.設計閤成18條序列特異性引物,探索最佳退火溫度,通過調整引物濃度、Mg2+離子濃度,使HPA-1～6繫統等位基因在同一條件下進行同步擴增和擴增產物在同一凝膠中進行同步電泳.引物的特異性和靈敏度採用基因型已知的質控DNA進行驗證.應用此方法,對2000年度國際輸血協會(ISBT)第十屆血小闆基因定型與血清學工作組送檢的15份攷覈樣本(其中血樣2份,DNA樣本13份)進行瞭基因分型.用此方法檢測質控DNA,結果與已知的HPA基因型完全相符;15份第十屆血小闆基因定型與血清學工作組的攷覈樣本的檢測結果,與ISBT公佈的結果完全相同,準確率達100%.
위연구채용PCR-SSP기술,건립가고적인류혈소판항원HPA-1,2,3,4,5,6계통적동보기인분형방법,병이소건립적방법연구혈소판항원.설계합성18조서렬특이성인물,탐색최가퇴화온도,통과조정인물농도、Mg2+리자농도,사HPA-1～6계통등위기인재동일조건하진행동보확증화확증산물재동일응효중진행동보전영.인물적특이성화령민도채용기인형이지적질공DNA진행험증.응용차방법,대2000년도국제수혈협회(ISBT)제십계혈소판기인정형여혈청학공작조송검적15빈고핵양본(기중혈양2빈,DNA양본13빈)진행료기인분형.용차방법검측질공DNA,결과여이지적HPA기인형완전상부;15빈제십계혈소판기인정형여혈청학공작조적고핵양본적검측결과,여ISBT공포적결과완전상동,준학솔체100%.
