山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2008年
3期
18-20
,共3页
郭慧%杜波%李晓明%路秀英
郭慧%杜波%李曉明%路秀英
곽혜%두파%리효명%로수영
RNA干扰%转录激活因子3%喉肿瘤%HEP-2细胞
RNA榦擾%轉錄激活因子3%喉腫瘤%HEP-2細胞
RNA간우%전록격활인자3%후종류%HEP-2세포
目的 构建携EGFP的信号转导与转录激活因子(STAT)3 mRNA的小RNA干扰(siRNA)表达载体,并检测STAT3表达及其对HEP-2细胞增殖的抑制作用.方法 合成用于产生针对STAT3的小发卡状RNA(shRNA)寡核苷酸,克隆到PGPU6/EGFP/Neo载体中,BbsⅠ和BamHⅠ双酶切及测序鉴定重组体,并转染HEP-2细胞.流式细胞仪、RT-PCR、免疫印迹、MTT法检测HEP-2细胞中STAT3的表达及该细胞的增殖情况.结果 成功构建STAT3-siRNA表达载体,转染HEP-2后可显著抑制细胞STAT3 mRNA及蛋白的表达,细胞增殖活性显著降低(P<0.05). 结论 用pGPU6/EGFP/Neo载体,针对不同靶位点构建的STAT3-siRNA表达载体可有效抑制喉癌细胞增殖及其STAT3的表达.
目的 構建攜EGFP的信號轉導與轉錄激活因子(STAT)3 mRNA的小RNA榦擾(siRNA)錶達載體,併檢測STAT3錶達及其對HEP-2細胞增殖的抑製作用.方法 閤成用于產生針對STAT3的小髮卡狀RNA(shRNA)寡覈苷痠,剋隆到PGPU6/EGFP/Neo載體中,BbsⅠ和BamHⅠ雙酶切及測序鑒定重組體,併轉染HEP-2細胞.流式細胞儀、RT-PCR、免疫印跡、MTT法檢測HEP-2細胞中STAT3的錶達及該細胞的增殖情況.結果 成功構建STAT3-siRNA錶達載體,轉染HEP-2後可顯著抑製細胞STAT3 mRNA及蛋白的錶達,細胞增殖活性顯著降低(P<0.05). 結論 用pGPU6/EGFP/Neo載體,針對不同靶位點構建的STAT3-siRNA錶達載體可有效抑製喉癌細胞增殖及其STAT3的錶達.
목적 구건휴EGFP적신호전도여전록격활인자(STAT)3 mRNA적소RNA간우(siRNA)표체재체,병검측STAT3표체급기대HEP-2세포증식적억제작용.방법 합성용우산생침대STAT3적소발잡상RNA(shRNA)과핵감산,극륭도PGPU6/EGFP/Neo재체중,BbsⅠ화BamHⅠ쌍매절급측서감정중조체,병전염HEP-2세포.류식세포의、RT-PCR、면역인적、MTT법검측HEP-2세포중STAT3적표체급해세포적증식정황.결과 성공구건STAT3-siRNA표체재체,전염HEP-2후가현저억제세포STAT3 mRNA급단백적표체,세포증식활성현저강저(P<0.05). 결론 용pGPU6/EGFP/Neo재체,침대불동파위점구건적STAT3-siRNA표체재체가유효억제후암세포증식급기STAT3적표체.
