CAJ | 학술논문

目的探讨单独和联合应用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与维甲酸(RA)对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)向神经元分化的影响,为其进一步临床应用提供理论基础.方法 hUCMSCs由天津国家干细胞中心提供.取传至第3代的hUCMSCs,根据培养液中加入不同诱导剂分为4组:空白对照组,不加任何诱导剂；bFGF组,加入20 ng/mL bFGF;RA组,加入0.5μg/mL RA；RA+bFGF组,加入0.5 μg/mL RA和20 ng/mL bFGF.细胞诱导培养后第12d,观察细胞形态的变化；采用免疫细胞化学方法检测神经前体细胞标记物Nestin、神经元标记物β-TubulinⅢ、神经胶质细胞标记物胶原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况,每组随机选择8个视野计算阳性细胞数,比较各组细胞阳性表达比例.结果空白对照组和bFGF组细胞诱导后形态变化不明显,Nestin和β-TubulinⅢ 阳性表达率均较低,但两者之间无统计学差别.RA组和RA +bFGF组细胞诱导第12d后,细胞胞质以胞核为中心收缩,部分胞质收缩形成细胞的突起,突起之间有网状连接,具有典型的神经元样形态；RA+ bFGF组的β-Tubulin Ⅲ阳性表达率比RA组显著增高(P＜0.01).实验各组GFAP表达阳性率均较低,但无统计学差异.结论 RA能促进hUCMSCs向神经细胞分化,单独使用bFGF并没有明显效果,而RA联合bFGF能显著促进hUCMSCs向神经元分化.
목적 탐토단독화연합응용감성성섬유세포생장인자(bFGF)여유갑산(RA)대인제대간충질간세포(hUCMSCs)향신경원분화적영향,위기진일보림상응용제공이론기출.방법 hUCMSCs유천진국가간세포중심제공.취전지제3대적hUCMSCs,근거배양액중가입불동유도제분위4조:공백대조조,불가임하유도제；bFGF조,가입20 ng/mL bFGF;RA조,가입0.5μg/mL RA；RA+bFGF조,가입0.5 μg/mL RA화20 ng/mL bFGF.세포유도배양후제12d,관찰세포형태적변화；채용면역세포화학방법검측신경전체세포표기물Nestin、신경원표기물β-TubulinⅢ、신경효질세포표기물효원섬유산성단백(GFAP)적표체정황,매조수궤선택8개시야계산양성세포수,비교각조세포양성표체비례.결과 공백대조조화bFGF조세포유도후형태변화불명현,Nestin화β-TubulinⅢ 양성표체솔균교저,단량자지간무통계학차별.RA조화RA +bFGF조세포유도제12d후,세포포질이포핵위중심수축,부분포질수축형성세포적돌기,돌기지간유망상련접,구유전형적신경원양형태；RA+ bFGF조적β-Tubulin Ⅲ양성표체솔비RA조현저증고(P＜0.01).실험각조GFAP표체양성솔균교저,단무통계학차이.결론 RA능촉진hUCMSCs향신경세포분화,단독사용bFGF병몰유명현효과,이RA연합bFGF능현저촉진hUCMSCs향신경원분화.