山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2011年
1期
1-3
,共3页
hTERT启动子%PE38KDEL%胰腺肿瘤%基因疗法
hTERT啟動子%PE38KDEL%胰腺腫瘤%基因療法
hTERT계동자%PE38KDEL%이선종류%기인요법
目的 探讨端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控铜绿假单胞菌外毒素衍生物(PE38KDEL)表达载体的构建及其在MiaPaCa2人胰腺癌细胞中的表达.方法 通过PCR法扩增hTERT启动子,全基因合成PE38KDEL,将其分别亚克隆到pIRES2-EGFP及phTERTp-IRES2-EGFP质粒的多克隆位点中;均经酶切及测序鉴定.通过脂质体法将两质粒分别转染MiaPaCa2及WI-38细胞,观察荧光表达情况,通过RT-PCR检测PE38KDEL的表达.结果 经酶切及测序鉴定证实质粒构建成功,pPE38KDEL-IRES2-EGFP转染后MiaPaCa2和WI-38细胞中均有PE38KDEL基因表达;但phTERTp-PE38KDEL-IRES2-EGFP转染后仅MiaPaCa2中有PE38KDEL基因表达.结论 hTERT调控下PE38KDEL表达载体构建成功,并可在MiaPaCa2人胰腺癌细胞中靶向性表达,为探讨胰腺癌的靶向基因治疗提供了实验依据.
目的 探討耑粒酶逆轉錄酶(hTERT)啟動子調控銅綠假單胞菌外毒素衍生物(PE38KDEL)錶達載體的構建及其在MiaPaCa2人胰腺癌細胞中的錶達.方法 通過PCR法擴增hTERT啟動子,全基因閤成PE38KDEL,將其分彆亞剋隆到pIRES2-EGFP及phTERTp-IRES2-EGFP質粒的多剋隆位點中;均經酶切及測序鑒定.通過脂質體法將兩質粒分彆轉染MiaPaCa2及WI-38細胞,觀察熒光錶達情況,通過RT-PCR檢測PE38KDEL的錶達.結果 經酶切及測序鑒定證實質粒構建成功,pPE38KDEL-IRES2-EGFP轉染後MiaPaCa2和WI-38細胞中均有PE38KDEL基因錶達;但phTERTp-PE38KDEL-IRES2-EGFP轉染後僅MiaPaCa2中有PE38KDEL基因錶達.結論 hTERT調控下PE38KDEL錶達載體構建成功,併可在MiaPaCa2人胰腺癌細胞中靶嚮性錶達,為探討胰腺癌的靶嚮基因治療提供瞭實驗依據.
목적 탐토단립매역전록매(hTERT)계동자조공동록가단포균외독소연생물(PE38KDEL)표체재체적구건급기재MiaPaCa2인이선암세포중적표체.방법 통과PCR법확증hTERT계동자,전기인합성PE38KDEL,장기분별아극륭도pIRES2-EGFP급phTERTp-IRES2-EGFP질립적다극륭위점중;균경매절급측서감정.통과지질체법장량질립분별전염MiaPaCa2급WI-38세포,관찰형광표체정황,통과RT-PCR검측PE38KDEL적표체.결과 경매절급측서감정증실질립구건성공,pPE38KDEL-IRES2-EGFP전염후MiaPaCa2화WI-38세포중균유PE38KDEL기인표체;단phTERTp-PE38KDEL-IRES2-EGFP전염후부MiaPaCa2중유PE38KDEL기인표체.결론 hTERT조공하PE38KDEL표체재체구건성공,병가재MiaPaCa2인이선암세포중파향성표체,위탐토이선암적파향기인치료제공료실험의거.
