山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2011年
43期
6-8
,共3页
温昱%李彬%党瑞山%张传森
溫昱%李彬%黨瑞山%張傳森
온욱%리빈%당서산%장전삼
骨髓%内皮祖细胞%细胞培养%细胞鉴定
骨髓%內皮祖細胞%細胞培養%細胞鑒定
골수%내피조세포%세포배양%세포감정
目的 探讨成人骨髓源内皮祖细胞(EPCs)体外分离培养的可行性.方法 抽取成年男性骨髓,体外全骨髓培养,传代后采用免疫微珠分选方法收集CD+133细胞,EGM-MV2条件培养基诱导培养EPCs,观察细胞形态、生长情况；采用流式细胞技术检测分选细胞纯度,免疫荧光法检测EPCs特殊分子标志物CD34、CD133和VE-cadherin表达,透射电子显微镜观察分选细胞超微结构,UEA-1和Dil-ac-LDL双染色法检测分选细胞的吞噬功能.结果 分选后细胞培养第3天出现集落样生长,集落边缘细胞形态伸展呈梭形或多边形,传代后呈现串珠样排列；培养至5～6 d,细胞连接成大片条索状结构；CD+34、CD+133细胞百分率分别为24.13％、93.29％,其表面特异性表达CD133、CD34、VE-cadherin,具有EPCs形态特征,能吞噬Dil-ac-LDL并结合UEA-1.结论 成人骨髓来源的EPCs经体外培养后形态、增殖率、生存能力、表面标志表达、功能等均较为稳定,可作为心血管组织工程种子细胞或用于干细胞治疗.
目的 探討成人骨髓源內皮祖細胞(EPCs)體外分離培養的可行性.方法 抽取成年男性骨髓,體外全骨髓培養,傳代後採用免疫微珠分選方法收集CD+133細胞,EGM-MV2條件培養基誘導培養EPCs,觀察細胞形態、生長情況；採用流式細胞技術檢測分選細胞純度,免疫熒光法檢測EPCs特殊分子標誌物CD34、CD133和VE-cadherin錶達,透射電子顯微鏡觀察分選細胞超微結構,UEA-1和Dil-ac-LDL雙染色法檢測分選細胞的吞噬功能.結果 分選後細胞培養第3天齣現集落樣生長,集落邊緣細胞形態伸展呈梭形或多邊形,傳代後呈現串珠樣排列；培養至5～6 d,細胞連接成大片條索狀結構；CD+34、CD+133細胞百分率分彆為24.13％、93.29％,其錶麵特異性錶達CD133、CD34、VE-cadherin,具有EPCs形態特徵,能吞噬Dil-ac-LDL併結閤UEA-1.結論 成人骨髓來源的EPCs經體外培養後形態、增殖率、生存能力、錶麵標誌錶達、功能等均較為穩定,可作為心血管組織工程種子細胞或用于榦細胞治療.
목적 탐토성인골수원내피조세포(EPCs)체외분리배양적가행성.방법 추취성년남성골수,체외전골수배양,전대후채용면역미주분선방법수집CD+133세포,EGM-MV2조건배양기유도배양EPCs,관찰세포형태、생장정황；채용류식세포기술검측분선세포순도,면역형광법검측EPCs특수분자표지물CD34、CD133화VE-cadherin표체,투사전자현미경관찰분선세포초미결구,UEA-1화Dil-ac-LDL쌍염색법검측분선세포적탄서공능.결과 분선후세포배양제3천출현집락양생장,집락변연세포형태신전정사형혹다변형,전대후정현천주양배렬；배양지5～6 d,세포련접성대편조색상결구；CD+34、CD+133세포백분솔분별위24.13％、93.29％,기표면특이성표체CD133、CD34、VE-cadherin,구유EPCs형태특정,능탄서Dil-ac-LDL병결합UEA-1.결론 성인골수래원적EPCs경체외배양후형태、증식솔、생존능력、표면표지표체、공능등균교위은정,가작위심혈관조직공정충자세포혹용우간세포치료.
