分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2009年
1期
1-7
,共7页
曹冬%张养军%韩春光%邓玉林%钱小红
曹鼕%張養軍%韓春光%鄧玉林%錢小紅
조동%장양군%한춘광%산옥림%전소홍
基质辅助激光解析电离飞行时间质谱%蛋白质%亚硝化
基質輔助激光解析電離飛行時間質譜%蛋白質%亞硝化
기질보조격광해석전리비행시간질보%단백질%아초화
亚硝基阴离子是生物体内重要的生物调控小分子,广泛分布于生物体的血液和组织中,能使蛋白质发生硝基化和亚硝基化修饰,并且调控生物体的多种生理过程.本研究应用高灵敏度的基质辅助激光解析电离-飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-MS)技术,以合成的标准肽段和肌红蛋白为模型系统.研究了蛋白质和多肽主链N端氨基与赖氨酸侧链氨基对HNO2反应的敏感性,并考察了反应体系和不同的反应时间对HNO2与多肽的反应完全程度的影响.结果表明,HNO2能与肽段N端的伯氨基发生重氮化反应,形成的叠氮化中间产物不稳定,放出氮气形成碳正离子,碳正离子可进一步发生取代或消除反应.发生取代反应,水溶液中的羟基取代N-末端氨基形成M+1产物,既使得产物比原肽段分子量多1 Da;发生消除反应,脱掉1分子的氨,又生成M-17烯烃衍生物,从而使产物比原肽段分子量少17 Da.当采用1 mol/L乙酸和1 mol/L的亚硝酸钠作为反应体系时,反应5 min, 肽段的N端氨基即可完全与HNO2反应生成羟基取代产物和烯烃衍生物.而在上述条件下,未发现赖氨酸侧链氨基与HNO2反应,说明HNO2主要与肽段和蛋白的N端氨基发生反应.
亞硝基陰離子是生物體內重要的生物調控小分子,廣汎分佈于生物體的血液和組織中,能使蛋白質髮生硝基化和亞硝基化脩飾,併且調控生物體的多種生理過程.本研究應用高靈敏度的基質輔助激光解析電離-飛行時間串聯質譜(MALDI-TOF-MS)技術,以閤成的標準肽段和肌紅蛋白為模型繫統.研究瞭蛋白質和多肽主鏈N耑氨基與賴氨痠側鏈氨基對HNO2反應的敏感性,併攷察瞭反應體繫和不同的反應時間對HNO2與多肽的反應完全程度的影響.結果錶明,HNO2能與肽段N耑的伯氨基髮生重氮化反應,形成的疊氮化中間產物不穩定,放齣氮氣形成碳正離子,碳正離子可進一步髮生取代或消除反應.髮生取代反應,水溶液中的羥基取代N-末耑氨基形成M+1產物,既使得產物比原肽段分子量多1 Da;髮生消除反應,脫掉1分子的氨,又生成M-17烯烴衍生物,從而使產物比原肽段分子量少17 Da.噹採用1 mol/L乙痠和1 mol/L的亞硝痠鈉作為反應體繫時,反應5 min, 肽段的N耑氨基即可完全與HNO2反應生成羥基取代產物和烯烴衍生物.而在上述條件下,未髮現賴氨痠側鏈氨基與HNO2反應,說明HNO2主要與肽段和蛋白的N耑氨基髮生反應.
아초기음리자시생물체내중요적생물조공소분자,엄범분포우생물체적혈액화조직중,능사단백질발생초기화화아초기화수식,병차조공생물체적다충생리과정.본연구응용고령민도적기질보조격광해석전리-비행시간천련질보(MALDI-TOF-MS)기술,이합성적표준태단화기홍단백위모형계통.연구료단백질화다태주련N단안기여뢰안산측련안기대HNO2반응적민감성,병고찰료반응체계화불동적반응시간대HNO2여다태적반응완전정도적영향.결과표명,HNO2능여태단N단적백안기발생중담화반응,형성적첩담화중간산물불은정,방출담기형성탄정리자,탄정리자가진일보발생취대혹소제반응.발생취대반응,수용액중적간기취대N-말단안기형성M+1산물,기사득산물비원태단분자량다1 Da;발생소제반응,탈도1분자적안,우생성M-17희경연생물,종이사산물비원태단분자량소17 Da.당채용1 mol/L을산화1 mol/L적아초산납작위반응체계시,반응5 min, 태단적N단안기즉가완전여HNO2반응생성간기취대산물화희경연생물.이재상술조건하,미발현뢰안산측련안기여HNO2반응,설명HNO2주요여태단화단백적N단안기발생반응.
