山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2011年
43期
20-22
,共3页
肖卫东%李勇%李学明%蔡军%邓君%曾林山%胡伟
肖衛東%李勇%李學明%蔡軍%鄧君%曾林山%鬍偉
초위동%리용%리학명%채군%산군%증림산%호위
胰腺肿瘤,胰腺癌%Cyclin D1基因%RNA干扰%细胞增殖%细胞凋亡
胰腺腫瘤,胰腺癌%Cyclin D1基因%RNA榦擾%細胞增殖%細胞凋亡
이선종류,이선암%Cyclin D1기인%RNA간우%세포증식%세포조망
目的 探讨以细胞周期蛋白(Cyclin) D1为靶基因的RNA干扰对胰腺癌AsPC-1细胞增殖和凋亡的影响,为胰腺癌的靶向治疗提供依据.方法 用含有10％ FBS的DMEM培养液在37℃、5％CO2培养箱中常规培养AsPC-1细胞,至对数生长期后接种于96孔培养板中,随机分为实验组、阴性对照组、空白对照组,并采用LipofectamineTM2000脂质体分别转染Cyclin D1-小干扰RNA(siRNA)、阴性对照siRNA、脂质体,48 h时收集细胞.应用荧光定量PCR法和Western blot法分别检测细胞中Cyclin D1 mRNA和蛋白表达水平,MTT法检测细胞体外增殖活力,流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡率(AI).结果与空白对照组和阴性对照组相比,实验组Cyclin D1 mRNA和蛋白表达均明显下调,细胞生长速度明显减慢,Go/G1细胞比例显著增大、S期细胞比例则明显降低、AI显著升高(P均＜0.01).结论 Cyclin D1-siRNA能通过沉默靶基因表达抑制AsPC-1细胞生长、改变细胞周期分布、诱导细胞凋亡,可作为胰腺癌基因治疗的一个有效靶点.
目的 探討以細胞週期蛋白(Cyclin) D1為靶基因的RNA榦擾對胰腺癌AsPC-1細胞增殖和凋亡的影響,為胰腺癌的靶嚮治療提供依據.方法 用含有10％ FBS的DMEM培養液在37℃、5％CO2培養箱中常規培養AsPC-1細胞,至對數生長期後接種于96孔培養闆中,隨機分為實驗組、陰性對照組、空白對照組,併採用LipofectamineTM2000脂質體分彆轉染Cyclin D1-小榦擾RNA(siRNA)、陰性對照siRNA、脂質體,48 h時收集細胞.應用熒光定量PCR法和Western blot法分彆檢測細胞中Cyclin D1 mRNA和蛋白錶達水平,MTT法檢測細胞體外增殖活力,流式細胞儀檢測細胞週期分佈及凋亡率(AI).結果與空白對照組和陰性對照組相比,實驗組Cyclin D1 mRNA和蛋白錶達均明顯下調,細胞生長速度明顯減慢,Go/G1細胞比例顯著增大、S期細胞比例則明顯降低、AI顯著升高(P均＜0.01).結論 Cyclin D1-siRNA能通過沉默靶基因錶達抑製AsPC-1細胞生長、改變細胞週期分佈、誘導細胞凋亡,可作為胰腺癌基因治療的一箇有效靶點.
목적 탐토이세포주기단백(Cyclin) D1위파기인적RNA간우대이선암AsPC-1세포증식화조망적영향,위이선암적파향치료제공의거.방법 용함유10％ FBS적DMEM배양액재37℃、5％CO2배양상중상규배양AsPC-1세포,지대수생장기후접충우96공배양판중,수궤분위실험조、음성대조조、공백대조조,병채용LipofectamineTM2000지질체분별전염Cyclin D1-소간우RNA(siRNA)、음성대조siRNA、지질체,48 h시수집세포.응용형광정량PCR법화Western blot법분별검측세포중Cyclin D1 mRNA화단백표체수평,MTT법검측세포체외증식활력,류식세포의검측세포주기분포급조망솔(AI).결과여공백대조조화음성대조조상비,실험조Cyclin D1 mRNA화단백표체균명현하조,세포생장속도명현감만,Go/G1세포비례현저증대、S기세포비례칙명현강저、AI현저승고(P균＜0.01).결론 Cyclin D1-siRNA능통과침묵파기인표체억제AsPC-1세포생장、개변세포주기분포、유도세포조망,가작위이선암기인치료적일개유효파점.
