山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2008年
48期
3-5
,共3页
熊建军%龚帧%吴周环%林玲%李雪芹
熊建軍%龔幀%吳週環%林玲%李雪芹
웅건군%공정%오주배%림령%리설근
氧化还原因子-1%逆转录病毒%RNA干扰%顺铂
氧化還原因子-1%逆轉錄病毒%RNA榦擾%順鉑
양화환원인자-1%역전록병독%RNA간우%순박
目的 建立表达氧化还原因子-1(Ref-1)小分子干扰RNA的重组逆转录病毒载体pmscv/siRef-1,观察人肝癌细胞株HepG2下调内源性Ref-1后对顺铂的敏感性变化.方法 采用基因重组技术构建逆转录病毒载体pmscv/siRef-1.包装逆转录病毒,感染HepG2.RT-PCR及Western blot法检测感染后细胞内Ref-1 mRNA 和蛋白表达,MTT法检测HepG2细胞下调Ref-1表达后对顺铂的敏感性变化.结果 pmscv/siRef-1能有效被包装并感染靶细胞,感染pmscv/siRef-1病毒的HepG2细胞Ref-1蛋白与mRNA表达量明显降低,细胞对顺铂敏感性显著增加(P＜0.05).结论 成功构建以逆转录病毒为基础的抑制内源性Ref-1表达的RNA 干扰载体;RNA干扰Ref-1基因可显著提高HepG2细胞对顺铂的敏感性.
目的 建立錶達氧化還原因子-1(Ref-1)小分子榦擾RNA的重組逆轉錄病毒載體pmscv/siRef-1,觀察人肝癌細胞株HepG2下調內源性Ref-1後對順鉑的敏感性變化.方法 採用基因重組技術構建逆轉錄病毒載體pmscv/siRef-1.包裝逆轉錄病毒,感染HepG2.RT-PCR及Western blot法檢測感染後細胞內Ref-1 mRNA 和蛋白錶達,MTT法檢測HepG2細胞下調Ref-1錶達後對順鉑的敏感性變化.結果 pmscv/siRef-1能有效被包裝併感染靶細胞,感染pmscv/siRef-1病毒的HepG2細胞Ref-1蛋白與mRNA錶達量明顯降低,細胞對順鉑敏感性顯著增加(P＜0.05).結論 成功構建以逆轉錄病毒為基礎的抑製內源性Ref-1錶達的RNA 榦擾載體;RNA榦擾Ref-1基因可顯著提高HepG2細胞對順鉑的敏感性.
목적 건립표체양화환원인자-1(Ref-1)소분자간우RNA적중조역전록병독재체pmscv/siRef-1,관찰인간암세포주HepG2하조내원성Ref-1후대순박적민감성변화.방법 채용기인중조기술구건역전록병독재체pmscv/siRef-1.포장역전록병독,감염HepG2.RT-PCR급Western blot법검측감염후세포내Ref-1 mRNA 화단백표체,MTT법검측HepG2세포하조Ref-1표체후대순박적민감성변화.결과 pmscv/siRef-1능유효피포장병감염파세포,감염pmscv/siRef-1병독적HepG2세포Ref-1단백여mRNA표체량명현강저,세포대순박민감성현저증가(P＜0.05).결론 성공구건이역전록병독위기출적억제내원성Ref-1표체적RNA 간우재체;RNA간우Ref-1기인가현저제고HepG2세포대순박적민감성.
