山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2012年
13期
4-6
,共3页
龙璐璐%许文林%沈慧玲%冷加燕
龍璐璐%許文林%瀋慧玲%冷加燕
룡로로%허문림%침혜령%랭가연
胃肿瘤%三氧化二砷%自噬%YB-1%基因,Bcl-2%Beclinl
胃腫瘤%三氧化二砷%自噬%YB-1%基因,Bcl-2%Beclinl
위종류%삼양화이신%자서%YB-1%기인,Bcl-2%Beclinl
目的 研究YB-1抑制三氧化二砷(As2O3)诱导人胃癌BGC-823细胞自噬的机制.方法 采用脂质体转染siRNA干扰YB-1和腺病毒转染pAd1 Easy/YB-1过表达YB-1；实时荧光定量PCR检测Bcl-2和Beclinl基因转录；Western blot检测YB-1、Bcl-2、Beclin1、P62和LC3Ⅱ蛋白的表达；MDC染色、荧光显微镜观察自噬泡.结果 与空病毒(AdGFP)组相比,pAd1 Easy/YB-1(AdYB-1)组Bcl-2基因表达增高,而干扰质粒(siYB-1)组Bcl-2基因表达水平较空质粒(HK)组降低(P均＜0.05),各组Beclin1基因表达比较无统计学差异.与AdGFP和HK组相比,AdYB-1组Beclinl和LC3Ⅱ蛋白减少,Bcl-2和P62蛋白增加(P均＜0.01),siYB-1组Beclin1和LC3Ⅱ蛋白增加,Bcl-2和P62蛋白减少(P均＜0.01).与AdGFP组相比,AdYB-1组自噬泡聚集减少,加入Bcl-2抑制剂HA14-1后自噬泡重新聚集,Beclin1蛋白恢复表达,P62降解增加,LC3Ⅱ升高.结论 YB-1可能通过上调Bcl-2、抑制Beclin1,实现对As2O3诱导的BGC-823细胞自噬的抑制.
目的 研究YB-1抑製三氧化二砷(As2O3)誘導人胃癌BGC-823細胞自噬的機製.方法 採用脂質體轉染siRNA榦擾YB-1和腺病毒轉染pAd1 Easy/YB-1過錶達YB-1；實時熒光定量PCR檢測Bcl-2和Beclinl基因轉錄；Western blot檢測YB-1、Bcl-2、Beclin1、P62和LC3Ⅱ蛋白的錶達；MDC染色、熒光顯微鏡觀察自噬泡.結果 與空病毒(AdGFP)組相比,pAd1 Easy/YB-1(AdYB-1)組Bcl-2基因錶達增高,而榦擾質粒(siYB-1)組Bcl-2基因錶達水平較空質粒(HK)組降低(P均＜0.05),各組Beclin1基因錶達比較無統計學差異.與AdGFP和HK組相比,AdYB-1組Beclinl和LC3Ⅱ蛋白減少,Bcl-2和P62蛋白增加(P均＜0.01),siYB-1組Beclin1和LC3Ⅱ蛋白增加,Bcl-2和P62蛋白減少(P均＜0.01).與AdGFP組相比,AdYB-1組自噬泡聚集減少,加入Bcl-2抑製劑HA14-1後自噬泡重新聚集,Beclin1蛋白恢複錶達,P62降解增加,LC3Ⅱ升高.結論 YB-1可能通過上調Bcl-2、抑製Beclin1,實現對As2O3誘導的BGC-823細胞自噬的抑製.
목적 연구YB-1억제삼양화이신(As2O3)유도인위암BGC-823세포자서적궤제.방법 채용지질체전염siRNA간우YB-1화선병독전염pAd1 Easy/YB-1과표체YB-1；실시형광정량PCR검측Bcl-2화Beclinl기인전록；Western blot검측YB-1、Bcl-2、Beclin1、P62화LC3Ⅱ단백적표체；MDC염색、형광현미경관찰자서포.결과 여공병독(AdGFP)조상비,pAd1 Easy/YB-1(AdYB-1)조Bcl-2기인표체증고,이간우질립(siYB-1)조Bcl-2기인표체수평교공질립(HK)조강저(P균＜0.05),각조Beclin1기인표체비교무통계학차이.여AdGFP화HK조상비,AdYB-1조Beclinl화LC3Ⅱ단백감소,Bcl-2화P62단백증가(P균＜0.01),siYB-1조Beclin1화LC3Ⅱ단백증가,Bcl-2화P62단백감소(P균＜0.01).여AdGFP조상비,AdYB-1조자서포취집감소,가입Bcl-2억제제HA14-1후자서포중신취집,Beclin1단백회복표체,P62강해증가,LC3Ⅱ승고.결론 YB-1가능통과상조Bcl-2、억제Beclin1,실현대As2O3유도적BGC-823세포자서적억제.
