凋亡素VP3蛋白的原核表达及纯化
조망소VP3단백적원핵표체급순화
  • 万方数据
    山东医药 산동의약
    SHANDONG MEDICAL JOURNAL
    2012年 17期 42-43 ,共2页

    邓守恒%柯贤柱%石小燕%蔡召忠%杨敬宁%黄永章%陈萍

    산수항%가현주%석소연%채소충%양경저%황영장%진평

    凋亡素%VP3%分离%提纯 凋亡素%VP3%分離%提純
    조망소%VP3%분리%제순
    目的 构建凋亡素VP3蛋白的原核表达质粒,并进行诱导表达和蛋白纯化.方法 采用PCR法自PGEX-6 P-1/TAT-VP3质粒中扩增VP3基因,运用靶向克隆酶将VP3基因插入线性pET15b,构建重组表达质粒pET-15b-VP3；经测序证实构建成功后转化E.coli Rosetta,表达凋亡素VP3蛋白；经Ni-NTA树脂亲和层析,对纯化产物进行SDS-PAGE、Western blotting分析鉴定.结果 成功构建凋亡素VP3蛋白原核表达质粒,表达并纯化了分子量为13.6 kD的凋亡素VP3蛋白.结论 凋亡素VP蛋白原核表达载体的构建及目的蛋白的表达纯化,为体内应用凋亡素VP3蛋白进行抗肿瘤研究奠定了基础.
    목적 구건조망소VP3단백적원핵표체질립,병진행유도표체화단백순화.방법 채용PCR법자PGEX-6 P-1/TAT-VP3질립중확증VP3기인,운용파향극륭매장VP3기인삽입선성pET15b,구건중조표체질립pET-15b-VP3；경측서증실구건성공후전화E.coli Rosetta,표체조망소VP3단백；경Ni-NTA수지친화층석,대순화산물진행SDS-PAGE、Western blotting분석감정.결과 성공구건조망소VP3단백원핵표체질립,표체병순화료분자량위13.6 kD적조망소VP3단백.결론 조망소VP단백원핵표체재체적구건급목적단백적표체순화,위체내응용조망소VP3단백진행항종류연구전정료기출.
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