北京师范大学学报(自然科学版)
北京師範大學學報(自然科學版)
북경사범대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF BEIJING NORMAL UNIVERSITY
2007年
5期
543-547
,共5页
库拉索芦荟%杂交片段扩增(HSA)%抑制PCR%表达序列标签
庫拉索蘆薈%雜交片段擴增(HSA)%抑製PCR%錶達序列標籤
고랍색호회%잡교편단확증(HSA)%억제PCR%표체서렬표첨
将微分离的库拉索芦荟(Alove vera[L.] Burm.f)6号染色体DNA及库拉索芦荟叶总cDNA分别用LA-PCR(linker adaptor polymerase chain reaction)方法扩增,然后采用杂交片段扩增技术(hybrid specific amplification,HSA)分离6号染色体与cDNA同源的表达序列片段.对表达序列片段进行克隆,得到约40000个重组子.随机选取96个克隆进行分析,分别用DIG标记6号染色体的LA-PCR产物和cDNA扩增产物作探针对其进行点杂交,对显示阳性信号的克隆进行测序.将库拉索芦荟6号染色体的表达序列标签(expressed sequence tags, EST)与GenBank中核苷酸进行比较,发现库拉索芦荟6号染色体的表达序列中有87.4%与植物的EST具有同源性,12.6%的EST与人或动物的EST具有较弱同源性,其中与石刁柏的EST及非生物素胁迫下的小麦(Triticum aestivum)、咖啡(coffee)、高梁(Sorghum bicolor)和菠萝(pineapple)等作物的EST具有很高的同源性(>93%).
將微分離的庫拉索蘆薈(Alove vera[L.] Burm.f)6號染色體DNA及庫拉索蘆薈葉總cDNA分彆用LA-PCR(linker adaptor polymerase chain reaction)方法擴增,然後採用雜交片段擴增技術(hybrid specific amplification,HSA)分離6號染色體與cDNA同源的錶達序列片段.對錶達序列片段進行剋隆,得到約40000箇重組子.隨機選取96箇剋隆進行分析,分彆用DIG標記6號染色體的LA-PCR產物和cDNA擴增產物作探針對其進行點雜交,對顯示暘性信號的剋隆進行測序.將庫拉索蘆薈6號染色體的錶達序列標籤(expressed sequence tags, EST)與GenBank中覈苷痠進行比較,髮現庫拉索蘆薈6號染色體的錶達序列中有87.4%與植物的EST具有同源性,12.6%的EST與人或動物的EST具有較弱同源性,其中與石刁柏的EST及非生物素脅迫下的小麥(Triticum aestivum)、咖啡(coffee)、高樑(Sorghum bicolor)和菠蘿(pineapple)等作物的EST具有很高的同源性(>93%).
장미분리적고랍색호회(Alove vera[L.] Burm.f)6호염색체DNA급고랍색호회협총cDNA분별용LA-PCR(linker adaptor polymerase chain reaction)방법확증,연후채용잡교편단확증기술(hybrid specific amplification,HSA)분리6호염색체여cDNA동원적표체서렬편단.대표체서렬편단진행극륭,득도약40000개중조자.수궤선취96개극륭진행분석,분별용DIG표기6호염색체적LA-PCR산물화cDNA확증산물작탐침대기진행점잡교,대현시양성신호적극륭진행측서.장고랍색호회6호염색체적표체서렬표첨(expressed sequence tags, EST)여GenBank중핵감산진행비교,발현고랍색호회6호염색체적표체서렬중유87.4%여식물적EST구유동원성,12.6%적EST여인혹동물적EST구유교약동원성,기중여석조백적EST급비생물소협박하적소맥(Triticum aestivum)、가배(coffee)、고량(Sorghum bicolor)화파라(pineapple)등작물적EST구유흔고적동원성(>93%).