遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2006年
1期
31-35
,共5页
杨瑞锋%舒建洪%李志艳%刘金龙%张涌
楊瑞鋒%舒建洪%李誌豔%劉金龍%張湧
양서봉%서건홍%리지염%류금룡%장용
核基质附着区%克隆%细胞表达
覈基質附著區%剋隆%細胞錶達
핵기질부착구%극륭%세포표체
从奶牛的全血中提取基因组DNA,参照GenBank已有序列,通过Primer5.0和Vector 7.0辅助设计一对引物,克隆了牛乳腺核基质附着区(BMRs).利用生物学软件对其进行初步分析后,TA克隆于pMD 18-T vector上.上下游引物5'端分别引入Kpn2 Ⅰ和Xho Ⅰ酶切位点,将所得的BMRs克隆到pEGFP-C1的报告基因下游,构建成表达载体pBE,脂质体法转染牛耳成纤维细胞.以转染pEGFP-C1的牛耳成纤维细胞作为对照,发现所克隆的BMRs功能明显,在消除位置效应、增强报告基因表达方面具有一定的作用.
從奶牛的全血中提取基因組DNA,參照GenBank已有序列,通過Primer5.0和Vector 7.0輔助設計一對引物,剋隆瞭牛乳腺覈基質附著區(BMRs).利用生物學軟件對其進行初步分析後,TA剋隆于pMD 18-T vector上.上下遊引物5'耑分彆引入Kpn2 Ⅰ和Xho Ⅰ酶切位點,將所得的BMRs剋隆到pEGFP-C1的報告基因下遊,構建成錶達載體pBE,脂質體法轉染牛耳成纖維細胞.以轉染pEGFP-C1的牛耳成纖維細胞作為對照,髮現所剋隆的BMRs功能明顯,在消除位置效應、增彊報告基因錶達方麵具有一定的作用.
종내우적전혈중제취기인조DNA,삼조GenBank이유서렬,통과Primer5.0화Vector 7.0보조설계일대인물,극륭료우유선핵기질부착구(BMRs).이용생물학연건대기진행초보분석후,TA극륭우pMD 18-T vector상.상하유인물5'단분별인입Kpn2 Ⅰ화Xho Ⅰ매절위점,장소득적BMRs극륭도pEGFP-C1적보고기인하유,구건성표체재체pBE,지질체법전염우이성섬유세포.이전염pEGFP-C1적우이성섬유세포작위대조,발현소극륭적BMRs공능명현,재소제위치효응、증강보고기인표체방면구유일정적작용.
