CAJ | 학술논문

肥大软骨细胞是软骨细胞的终末分化形式,在软骨内成骨过程中发挥十分关键的作用.为了研究肥大软骨细胞在骨骼发育过程中的功能,文章构建了在8.2kb小鼠X型胶原基因(Col10a1)启动子控制下表达Cre重组酶的转基因小鼠品系(Col10a1(8.2)-Cre).采用显微注射法将11.5 kb的转基因片段导入小鼠基因组.共注射受精卵328枚.获得子代鼠51只,经PCR基因型鉴定有3只在基因组上整合有Cre重组酶基因.PCR检测发现Col10a1(8.2)-Cre转基因在含有肥大软骨细胞的组织中表达.为了检测Cre重组酶表达的强度和组织特异性,转基因小鼠与ROSA26报告小鼠交配,子代ROSA26,Col10a1(8.2)-Cre双转基因小鼠LacZ染色检测的结果显示,Cre重组酶在所有的肥大软骨细胞中表达.原位杂交的结果证实Col10a1(8.2)-Cre转基因表达在肥大区的上端.通过对比发现Col10a1(8.2)-Cre转基因表达的组织特异性和强度均优于之前我们构建的Col10a1(1.0)-Cre转基因品系.以上结果表明,建立的肥大软骨细胞特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠品系可以作为一种遗传学工具,介导目的基因在肥大软骨细胞中的献除.
비대연골세포시연골세포적종말분화형식,재연골내성골과정중발휘십분관건적작용.위료연구비대연골세포재골격발육과정중적공능,문장구건료재8.2kb소서X형효원기인(Col10a1)계동자공제하표체Cre중조매적전기인소서품계(Col10a1(8.2)-Cre).채용현미주사법장11.5 kb적전기인편단도입소서기인조.공주사수정란328매.획득자대서51지,경PCR기인형감정유3지재기인조상정합유Cre중조매기인.PCR검측발현Col10a1(8.2)-Cre전기인재함유비대연골세포적조직중표체.위료검측Cre중조매표체적강도화조직특이성,전기인소서여ROSA26보고소서교배,자대ROSA26,Col10a1(8.2)-Cre쌍전기인소서LacZ염색검측적결과현시,Cre중조매재소유적비대연골세포중표체.원위잡교적결과증실Col10a1(8.2)-Cre전기인표체재비대구적상단.통과대비발현Col10a1(8.2)-Cre전기인표체적조직특이성화강도균우우지전아문구건적Col10a1(1.0)-Cre전기인품계.이상결과표명,건립적비대연골세포특이성표체Cre중조매적전기인소서품계가이작위일충유전학공구,개도목적기인재비대연골세포중적헌제.