分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2012年
8期
1236-1240
,共5页
赵永席%齐林%杨卫军%魏帅%王亚玲
趙永席%齊林%楊衛軍%魏帥%王亞玲
조영석%제림%양위군%위수%왕아령
铅(Ⅱ)%脱氧核酶%核酸切割酶%荧光循环放大检测
鉛(Ⅱ)%脫氧覈酶%覈痠切割酶%熒光循環放大檢測
연(Ⅱ)%탈양핵매%핵산절할매%형광순배방대검측
利用核酸切割酶(Nicking endonuclease)识别特定DNA双链并切割其中某条单链的性质,构建了基于8-17E脱氧核酶(8-17E DNAzyme)的pb2+荧光循环放大检测方法.pb2+可激活8-17E脱氧核酶水解RNA底物,产生并释放出的单链与分子信标探针( Molecular beacon,MB)杂交,导致其茎环结构被破坏,荧光信号恢复;同时形成含有核酸切割酶Nt.BbvCI识别位点的双链区域.在核酸切割酶Nt.BbvCI的作用下,分子信标探针被切割释放,游离出来的单链可与其它分子信标重新杂交,从而触发下一轮酶切,引起荧光检测信号的循环放大.本方法避免了8-17E脱氧核酶与底物链的修饰,最低可以检测出水溶液中1.0×10-10 mol/L Pb2+,并在2倍浓度的Zn2+,以及5倍浓度的其它干扰金属离子存在的情况下对pb2+显示出良好的选择性.本方法对环境水样中pb2+的标准加样回收率为96.1%~108.0%.
利用覈痠切割酶(Nicking endonuclease)識彆特定DNA雙鏈併切割其中某條單鏈的性質,構建瞭基于8-17E脫氧覈酶(8-17E DNAzyme)的pb2+熒光循環放大檢測方法.pb2+可激活8-17E脫氧覈酶水解RNA底物,產生併釋放齣的單鏈與分子信標探針( Molecular beacon,MB)雜交,導緻其莖環結構被破壞,熒光信號恢複;同時形成含有覈痠切割酶Nt.BbvCI識彆位點的雙鏈區域.在覈痠切割酶Nt.BbvCI的作用下,分子信標探針被切割釋放,遊離齣來的單鏈可與其它分子信標重新雜交,從而觸髮下一輪酶切,引起熒光檢測信號的循環放大.本方法避免瞭8-17E脫氧覈酶與底物鏈的脩飾,最低可以檢測齣水溶液中1.0×10-10 mol/L Pb2+,併在2倍濃度的Zn2+,以及5倍濃度的其它榦擾金屬離子存在的情況下對pb2+顯示齣良好的選擇性.本方法對環境水樣中pb2+的標準加樣迴收率為96.1%~108.0%.
이용핵산절할매(Nicking endonuclease)식별특정DNA쌍련병절할기중모조단련적성질,구건료기우8-17E탈양핵매(8-17E DNAzyme)적pb2+형광순배방대검측방법.pb2+가격활8-17E탈양핵매수해RNA저물,산생병석방출적단련여분자신표탐침( Molecular beacon,MB)잡교,도치기경배결구피파배,형광신호회복;동시형성함유핵산절할매Nt.BbvCI식별위점적쌍련구역.재핵산절할매Nt.BbvCI적작용하,분자신표탐침피절할석방,유리출래적단련가여기타분자신표중신잡교,종이촉발하일륜매절,인기형광검측신호적순배방대.본방법피면료8-17E탈양핵매여저물련적수식,최저가이검측출수용액중1.0×10-10 mol/L Pb2+,병재2배농도적Zn2+,이급5배농도적기타간우금속리자존재적정황하대pb2+현시출량호적선택성.본방법대배경수양중pb2+적표준가양회수솔위96.1%~108.0%.