山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2005年
12期
15-16
,共2页
张利群%陈杭薇%王四海%辛庆红%杜玉国%尤兰华
張利群%陳杭薇%王四海%辛慶紅%杜玉國%尤蘭華
장리군%진항미%왕사해%신경홍%두옥국%우란화
人呼吸道合胞病毒%肺腺癌细胞%M2-1基因%逆转录聚合酶链反应
人呼吸道閤胞病毒%肺腺癌細胞%M2-1基因%逆轉錄聚閤酶鏈反應
인호흡도합포병독%폐선암세포%M2-1기인%역전록취합매련반응
目的获得稳定表达人呼吸道合胞病毒(hRSV)M2-1基因的人肺腺癌细胞系.方法通过基因重组法构建hRSV M2-1基因真核表达载体,用脂质体将其转染人肺腺癌PAa和A549细胞,经G418筛选获得阳性表达细胞株,并用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western Blot进行验证.结果得到了约650bp的基因插入片段,DNA测序表明该基因高度保守.筛选出了稳定高量表达M2-1基因的PAa和A549细胞,并被证实有M2-1蛋白表达.结论获得了稳定表达hRSV M2-1蛋白的PAa和A549细胞株.
目的穫得穩定錶達人呼吸道閤胞病毒(hRSV)M2-1基因的人肺腺癌細胞繫.方法通過基因重組法構建hRSV M2-1基因真覈錶達載體,用脂質體將其轉染人肺腺癌PAa和A549細胞,經G418篩選穫得暘性錶達細胞株,併用逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)和Western Blot進行驗證.結果得到瞭約650bp的基因插入片段,DNA測序錶明該基因高度保守.篩選齣瞭穩定高量錶達M2-1基因的PAa和A549細胞,併被證實有M2-1蛋白錶達.結論穫得瞭穩定錶達hRSV M2-1蛋白的PAa和A549細胞株.
목적획득은정표체인호흡도합포병독(hRSV)M2-1기인적인폐선암세포계.방법통과기인중조법구건hRSV M2-1기인진핵표체재체,용지질체장기전염인폐선암PAa화A549세포,경G418사선획득양성표체세포주,병용역전록-취합매련반응(RT-PCR)화Western Blot진행험증.결과득도료약650bp적기인삽입편단,DNA측서표명해기인고도보수.사선출료은정고량표체M2-1기인적PAa화A549세포,병피증실유M2-1단백표체.결론획득료은정표체hRSV M2-1단백적PAa화A549세포주.
