遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2011年
3期
246-250
,共5页
张莹%胡丽玲%谢伟%孙蓓%左爱军%张镜宇
張瑩%鬍麗玲%謝偉%孫蓓%左愛軍%張鏡宇
장형%호려령%사위%손배%좌애군%장경우
维甲酸X受体α%巢式PCR%免疫共沉淀
維甲痠X受體α%巢式PCR%免疫共沉澱
유갑산X수체α%소식PCR%면역공침정
维甲酸X受体α(RetinoidX receptor-α,RXR-α)属于核受体家族,在调节基因转录及信号转导方面发挥着重要的作用.为了深入研究RXR-α的生物学作用,文章利用RT-PCR技术扩增了人RXR-α基因,并将其克隆入原核表达载体pQE-30Xa,转化大肠杆菌M15[PREP4],异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,SDS-PAGE可见与预期大小相符的蛋白条带,Western blotting证实该条带为重组入RXR-α蛋白,并用Ni2-NTA柱进行亲和层析纯化.免疫共沉淀结果显示其具有与TRβI结合的能力.电泳迁移率改变实验(EMSA)显示RXR-α与TRβ1形成的杂二聚体具有与DNA结合的能力.结果显示,文章已成功建立了重组人RXR-α的大肠杆菌表达系统,表达产物具有很好的生物学活性.
維甲痠X受體α(RetinoidX receptor-α,RXR-α)屬于覈受體傢族,在調節基因轉錄及信號轉導方麵髮揮著重要的作用.為瞭深入研究RXR-α的生物學作用,文章利用RT-PCR技術擴增瞭人RXR-α基因,併將其剋隆入原覈錶達載體pQE-30Xa,轉化大腸桿菌M15[PREP4],異丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)誘導錶達,SDS-PAGE可見與預期大小相符的蛋白條帶,Western blotting證實該條帶為重組入RXR-α蛋白,併用Ni2-NTA柱進行親和層析純化.免疫共沉澱結果顯示其具有與TRβI結閤的能力.電泳遷移率改變實驗(EMSA)顯示RXR-α與TRβ1形成的雜二聚體具有與DNA結閤的能力.結果顯示,文章已成功建立瞭重組人RXR-α的大腸桿菌錶達繫統,錶達產物具有很好的生物學活性.
유갑산X수체α(RetinoidX receptor-α,RXR-α)속우핵수체가족,재조절기인전록급신호전도방면발휘착중요적작용.위료심입연구RXR-α적생물학작용,문장이용RT-PCR기술확증료인RXR-α기인,병장기극륭입원핵표체재체pQE-30Xa,전화대장간균M15[PREP4],이병기류대-β-D-반유당감(IPTG)유도표체,SDS-PAGE가견여예기대소상부적단백조대,Western blotting증실해조대위중조입RXR-α단백,병용Ni2-NTA주진행친화층석순화.면역공침정결과현시기구유여TRβI결합적능력.전영천이솔개변실험(EMSA)현시RXR-α여TRβ1형성적잡이취체구유여DNA결합적능력.결과현시,문장이성공건립료중조인RXR-α적대장간균표체계통,표체산물구유흔호적생물학활성.
