山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2007年
29期
10-12
,共3页
陈凤花%胡丽华%王琳%李一荣%周志明
陳鳳花%鬍麗華%王琳%李一榮%週誌明
진봉화%호려화%왕림%리일영%주지명
BMI-1%SYBR Green Ⅰ%荧光光度测定法
BMI-1%SYBR Green Ⅰ%熒光光度測定法
BMI-1%SYBR Green Ⅰ%형광광도측정법
目的 建立SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR定量检测人类BMI-1 mRNA的方法.方法 以含有目的基因BMI-1 cDNA的质粒pEGFP-BMI-1为阳性模板,进行纯化和定量及系列稀释,应用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测BMI-1,建立标准曲线,熔解曲线分析产物的特异性.结果 该法检测的线性范围为6.4×101～6.4×107拷贝,相关系数r为-1.00,6.4×103拷贝/反应的标本批内变异系数(CV)和日间CV分别为1.6%和2.8%.熔解曲线分析显示单一的峰,Tm为(80.40±0.18)℃.结论 SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR定量检测BMI-1 mRNA是快速有效、灵敏度高、特异性好的方法,可为BMI-Ⅰ的进一步研究奠定基础.
目的 建立SYBR Green Ⅰ實時熒光PCR定量檢測人類BMI-1 mRNA的方法.方法 以含有目的基因BMI-1 cDNA的質粒pEGFP-BMI-1為暘性模闆,進行純化和定量及繫列稀釋,應用SYBR Green Ⅰ實時熒光定量PCR檢測BMI-1,建立標準麯線,鎔解麯線分析產物的特異性.結果 該法檢測的線性範圍為6.4×101～6.4×107拷貝,相關繫數r為-1.00,6.4×103拷貝/反應的標本批內變異繫數(CV)和日間CV分彆為1.6%和2.8%.鎔解麯線分析顯示單一的峰,Tm為(80.40±0.18)℃.結論 SYBR Green Ⅰ實時熒光PCR定量檢測BMI-1 mRNA是快速有效、靈敏度高、特異性好的方法,可為BMI-Ⅰ的進一步研究奠定基礎.
목적 건립SYBR Green Ⅰ실시형광PCR정량검측인류BMI-1 mRNA적방법.방법 이함유목적기인BMI-1 cDNA적질립pEGFP-BMI-1위양성모판,진행순화화정량급계렬희석,응용SYBR Green Ⅰ실시형광정량PCR검측BMI-1,건립표준곡선,용해곡선분석산물적특이성.결과 해법검측적선성범위위6.4×101～6.4×107고패,상관계수r위-1.00,6.4×103고패/반응적표본비내변이계수(CV)화일간CV분별위1.6%화2.8%.용해곡선분석현시단일적봉,Tm위(80.40±0.18)℃.결론 SYBR Green Ⅰ실시형광PCR정량검측BMI-1 mRNA시쾌속유효、령민도고、특이성호적방법,가위BMI-Ⅰ적진일보연구전정기출.
