结肠癌SW480细胞中miR-142-3p靶基因的确定及意义
결장암SW480세포중miR-142-3p파기인적학정급의의
Identification of target gene TCF7 of miR-142-3p in colon cancer cells SW480
  • 万方数据
    山东医药 산동의약
    SHANDONG MEDICAL JOURNAL
    2013年 32期 8-11,15 ,共5页

    周嘉梁%蔡炜%姜智%邹士涛%王震吾%王明智%张云霞%史冬涛%陈卫昌

    주가량%채위%강지%추사도%왕진오%왕명지%장운하%사동도%진위창

    结肠肿瘤%miRNA-142-3p%靶基因%TCF7基因 結腸腫瘤%miRNA-142-3p%靶基因%TCF7基因
    결장종류%miRNA-142-3p%파기인%TCF7기인
    colonic neoplasms%miRNA-142-3p%target genes%TCF7 gene
    目的 确定结肠癌SW480细胞中miR-142-3p的靶基因,探讨miR-142-3p与其靶基因的相互作用.方法 通过miRNA数据库预测可能与miR-142-3p相互作用的靶基因,构建miR-142-3p及阴性对照序列;将miR-142-3p、对照序列、TCF7的3'非翻译区(3'UTR)以及突变的TCF7 3'UTR分别克隆到表达载体上,共转染SW480细胞,36 h后检测绿色荧光蛋白的表达水平;Trizol抽提RNA,RT-PCR检测TCF7 mRNA表达水平;Western blot检测TCF7蛋白表达水平.结果 生物信息学方法预测TCF7可能为miR-142-3p的靶基因,进一步双荧光素酶报告实验验证了miR-142-3p可以与TCF7的3'UTR结合,阻断TCF7蛋白翻译过程,从而下调TCF7的蛋白水平.结论 TCF7可能为miR-142-3p的靶基因,miR-142-3p通过转录后负调控靶基因TCF7蛋白的表达.
    목적 학정결장암SW480세포중miR-142-3p적파기인,탐토miR-142-3p여기파기인적상호작용.방법 통과miRNA수거고예측가능여miR-142-3p상호작용적파기인,구건miR-142-3p급음성대조서렬;장miR-142-3p、대조서렬、TCF7적3'비번역구(3'UTR)이급돌변적TCF7 3'UTR분별극륭도표체재체상,공전염SW480세포,36 h후검측록색형광단백적표체수평;Trizol추제RNA,RT-PCR검측TCF7 mRNA표체수평;Western blot검측TCF7단백표체수평.결과 생물신식학방법예측TCF7가능위miR-142-3p적파기인,진일보쌍형광소매보고실험험증료miR-142-3p가이여TCF7적3'UTR결합,조단TCF7단백번역과정,종이하조TCF7적단백수평.결론 TCF7가능위miR-142-3p적파기인,miR-142-3p통과전록후부조공파기인TCF7단백적표체.
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