分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2014年
4期
489-494
,共6页
汤薇%王辉%王洪红%李正平
湯薇%王輝%王洪紅%李正平
탕미%왕휘%왕홍홍%리정평
特定序列DNA的检测%等温指数扩增(IEXPAR)%Hemin-G4模拟酶%显色分析
特定序列DNA的檢測%等溫指數擴增(IEXPAR)%Hemin-G4模擬酶%顯色分析
특정서렬DNA적검측%등온지수확증(IEXPAR)%Hemin-G4모의매%현색분석
Sequence-specific DNA detection%Isothermal exponential amplification reaction%Hemin-G4 mimic enzyme%Colorimetric analysis
基于血红素(Hemin)与G-四联体(G4)所形成模拟酶的催化作用,结合等温指数扩增反应(IEX-PAR),建立了特定序列DNA的显色检测方法.目标DNA引发IEXPAR,通过设计模板序列,IEXPAR产生大量富含鸟嘌呤的单链DNA,在K+存在时,该单链DNA可形成G4结构,G4可以与Hemin结合形成具有过氧化物酶活性的模拟酶(Hemin-G4),Hemin-G4催化H2 O2氧化2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS),使体系颜色发生变化,反应产物最大吸收波长为421 nm.对显色反应体系中的实验参数进行了优化,包括Hemin浓度、ABTS浓度、H2 O2浓度、IEXPAR时间和显色反应时间.在最佳条件下,所建立的体系可以简便、快速检测0.1 ～ 10 nmol/L的目标DNA分子,且本方法能够很好地区分单个碱基的差别,具有良好的特异性.
基于血紅素(Hemin)與G-四聯體(G4)所形成模擬酶的催化作用,結閤等溫指數擴增反應(IEX-PAR),建立瞭特定序列DNA的顯色檢測方法.目標DNA引髮IEXPAR,通過設計模闆序列,IEXPAR產生大量富含鳥嘌呤的單鏈DNA,在K+存在時,該單鏈DNA可形成G4結構,G4可以與Hemin結閤形成具有過氧化物酶活性的模擬酶(Hemin-G4),Hemin-G4催化H2 O2氧化2,2-聯氮-二(3-乙基-苯併噻唑-6-磺痠)二銨鹽(ABTS),使體繫顏色髮生變化,反應產物最大吸收波長為421 nm.對顯色反應體繫中的實驗參數進行瞭優化,包括Hemin濃度、ABTS濃度、H2 O2濃度、IEXPAR時間和顯色反應時間.在最佳條件下,所建立的體繫可以簡便、快速檢測0.1 ～ 10 nmol/L的目標DNA分子,且本方法能夠很好地區分單箇堿基的差彆,具有良好的特異性.
기우혈홍소(Hemin)여G-사련체(G4)소형성모의매적최화작용,결합등온지수확증반응(IEX-PAR),건립료특정서렬DNA적현색검측방법.목표DNA인발IEXPAR,통과설계모판서렬,IEXPAR산생대량부함조표령적단련DNA,재K+존재시,해단련DNA가형성G4결구,G4가이여Hemin결합형성구유과양화물매활성적모의매(Hemin-G4),Hemin-G4최화H2 O2양화2,2-련담-이(3-을기-분병새서-6-광산)이안염(ABTS),사체계안색발생변화,반응산물최대흡수파장위421 nm.대현색반응체계중적실험삼수진행료우화,포괄Hemin농도、ABTS농도、H2 O2농도、IEXPAR시간화현색반응시간.재최가조건하,소건립적체계가이간편、쾌속검측0.1 ～ 10 nmol/L적목표DNA분자,차본방법능구흔호지구분단개감기적차별,구유량호적특이성.
