现代中西医结合杂志
現代中西醫結閤雜誌
현대중서의결합잡지
MODERN JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL CHINESE AND WESTERN MEDICINE
2014年
6期
583-587
,共5页
孙莉萍%倪晶%庄菊花%胡翠华
孫莉萍%倪晶%莊菊花%鬍翠華
손리평%예정%장국화%호취화
胰腺%RNA干扰%端粒酶
胰腺%RNA榦擾%耑粒酶
이선%RNA간우%단립매
pancreas%RNA interference%telomerase
目的 探讨RNA干扰(RNAi)对胰腺癌Capan-2细胞人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的抑制效应.方法 化学合成靶向于hTERT基因的4个小分子干扰RNA(siRNA)序列,用阳离子脂质体为载体转染Capan-2细胞,分为siRNA1 ～ SinRNA 4、siRNA阴性对照和空白对照6组.通过RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测胰腺癌细胞转染后细胞hTERT mRNA和蛋白水平,并用MTS法检测细胞生长增殖.结果 siRNA1～siRNA 4组hTERT mRNA相对表达量分别为0.51±0.22,0.56±0.19,0.44±0.13和0.89±0.21,端粒酶相对活性分别为0.60±0.15,0.63±0.16,0.17±0.12和0.72±0.16,hTERT蛋白相对表达量分别为0.47±0.21,0.52±0.19,0.10±0.11和0.84 ±0.15,其中siRNA1 ～ siRNA3 3组的hTERT mRNA表达量、端粒酶活性和蛋白表达量与空白对照组比较有显著性差异(P均＜0.05).siRNA1～siRNA44组Capan-2细胞在转染后48 h时的细胞增长平均抑制率分别为50％,54％,63％和18％.不同siRNA序列对Capan-2的转染效率不同,其中siRNA3组能显著下调hTERT mRNA和蛋白的表达水平,并能抑制端粒酶活性和促进Capan-2细胞凋亡,与空白对照组比较均有显著性差异(P均＜0.01).结论 靶向hTERT的RNAi能明显抑制Capan-2细胞的增殖,hTERT可作为胰腺癌基因治疗的靶点.
目的 探討RNA榦擾(RNAi)對胰腺癌Capan-2細胞人耑粒酶逆轉錄酶(hTERT)基因的抑製效應.方法 化學閤成靶嚮于hTERT基因的4箇小分子榦擾RNA(siRNA)序列,用暘離子脂質體為載體轉染Capan-2細胞,分為siRNA1 ～ SinRNA 4、siRNA陰性對照和空白對照6組.通過RT-PCR和蛋白質印跡法分彆檢測胰腺癌細胞轉染後細胞hTERT mRNA和蛋白水平,併用MTS法檢測細胞生長增殖.結果 siRNA1～siRNA 4組hTERT mRNA相對錶達量分彆為0.51±0.22,0.56±0.19,0.44±0.13和0.89±0.21,耑粒酶相對活性分彆為0.60±0.15,0.63±0.16,0.17±0.12和0.72±0.16,hTERT蛋白相對錶達量分彆為0.47±0.21,0.52±0.19,0.10±0.11和0.84 ±0.15,其中siRNA1 ～ siRNA3 3組的hTERT mRNA錶達量、耑粒酶活性和蛋白錶達量與空白對照組比較有顯著性差異(P均＜0.05).siRNA1～siRNA44組Capan-2細胞在轉染後48 h時的細胞增長平均抑製率分彆為50％,54％,63％和18％.不同siRNA序列對Capan-2的轉染效率不同,其中siRNA3組能顯著下調hTERT mRNA和蛋白的錶達水平,併能抑製耑粒酶活性和促進Capan-2細胞凋亡,與空白對照組比較均有顯著性差異(P均＜0.01).結論 靶嚮hTERT的RNAi能明顯抑製Capan-2細胞的增殖,hTERT可作為胰腺癌基因治療的靶點.
목적 탐토RNA간우(RNAi)대이선암Capan-2세포인단립매역전록매(hTERT)기인적억제효응.방법 화학합성파향우hTERT기인적4개소분자간우RNA(siRNA)서렬,용양리자지질체위재체전염Capan-2세포,분위siRNA1 ～ SinRNA 4、siRNA음성대조화공백대조6조.통과RT-PCR화단백질인적법분별검측이선암세포전염후세포hTERT mRNA화단백수평,병용MTS법검측세포생장증식.결과 siRNA1～siRNA 4조hTERT mRNA상대표체량분별위0.51±0.22,0.56±0.19,0.44±0.13화0.89±0.21,단립매상대활성분별위0.60±0.15,0.63±0.16,0.17±0.12화0.72±0.16,hTERT단백상대표체량분별위0.47±0.21,0.52±0.19,0.10±0.11화0.84 ±0.15,기중siRNA1 ～ siRNA3 3조적hTERT mRNA표체량、단립매활성화단백표체량여공백대조조비교유현저성차이(P균＜0.05).siRNA1～siRNA44조Capan-2세포재전염후48 h시적세포증장평균억제솔분별위50％,54％,63％화18％.불동siRNA서렬대Capan-2적전염효솔불동,기중siRNA3조능현저하조hTERT mRNA화단백적표체수평,병능억제단립매활성화촉진Capan-2세포조망,여공백대조조비교균유현저성차이(P균＜0.01).결론 파향hTERT적RNAi능명현억제Capan-2세포적증식,hTERT가작위이선암기인치료적파점.
