CAJ | 학술논문

以0.1 μmol/L β-casein磷酸化蛋白酶解液为对象,利用在酸性条件下对PO3-4能够特异性吸附的氧化铁材料为新载体,对介孔氧化铁材料富集分离磷酸化肽段的孵育液酸含量、孵育液有机溶剂含量和洗脱液选择的条件进行了优化,结果表明:室温条件下,在含有0.1%乙酸和30%乙腈的孵育液中孵育5 min后,经1 mol/L NH3·H2O溶液的洗脱,介孔氧化铁可有效地将磷酸化肽段从蛋白酶解液中富集分离.本方法也可以选择性地提取α-casein磷酸化蛋白,实现了简单、快速、高效的磷酸化肽段和蛋白的富集分离.同时,通过MALDI-TOF串级质谱分析,成功地完成了在优化条件下分离出的磷酸化肽段磷酸位点的鉴定.
이0.1 μmol/L β-casein린산화단백매해액위대상,이용재산성조건하대PO3-4능구특이성흡부적양화철재료위신재체,대개공양화철재료부집분리린산화태단적부육액산함량、부육액유궤용제함량화세탈액선택적조건진행료우화,결과표명:실온조건하,재함유0.1%을산화30%을정적부육액중부육5 min후,경1 mol/L NH3·H2O용액적세탈,개공양화철가유효지장린산화태단종단백매해액중부집분리.본방법야가이선택성지제취α-casein린산화단백,실현료간단、쾌속、고효적린산화태단화단백적부집분리.동시,통과MALDI-TOF천급질보분석,성공지완성료재우화조건하분리출적린산화태단린산위점적감정.