山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2011年
20期
45-46,后插2
,共3页
Western blot%细胞色素C%大鼠
Western blot%細胞色素C%大鼠
Western blot%세포색소C%대서
目的:探讨用Western blot技术检测胞质中细胞色素C(Cyt C)的最佳转膜时间.方法:取大鼠小肠上皮细胞,提取胞质蛋白.蛋白定量后,取20μg样品上样于聚丙烯酞胺凝胶电泳(SDS-PAGE).取22μm孔径硝酸纤维素膜(NC膜),电压100V,分别电转移15、30、60、90、120min.NC膜用丽春红染色,蒸馏水漂洗后加入Cyt C一抗、二抗孵育,放射自显影显色.结果:在转膜过程中,随着时间的增加,转移到NC膜的总蛋白增多;而Cyt C条带出现了先增加(30min),后减少,再增加(120min)的趋势.结论:Cyt C虽然是小分子量蛋白,但Western blot的转膜时间并不需要减少,相反要增加到120min才能得到最佳效果.
目的:探討用Western blot技術檢測胞質中細胞色素C(Cyt C)的最佳轉膜時間.方法:取大鼠小腸上皮細胞,提取胞質蛋白.蛋白定量後,取20μg樣品上樣于聚丙烯酞胺凝膠電泳(SDS-PAGE).取22μm孔徑硝痠纖維素膜(NC膜),電壓100V,分彆電轉移15、30、60、90、120min.NC膜用麗春紅染色,蒸餾水漂洗後加入Cyt C一抗、二抗孵育,放射自顯影顯色.結果:在轉膜過程中,隨著時間的增加,轉移到NC膜的總蛋白增多;而Cyt C條帶齣現瞭先增加(30min),後減少,再增加(120min)的趨勢.結論:Cyt C雖然是小分子量蛋白,但Western blot的轉膜時間併不需要減少,相反要增加到120min纔能得到最佳效果.
목적:탐토용Western blot기술검측포질중세포색소C(Cyt C)적최가전막시간.방법:취대서소장상피세포,제취포질단백.단백정량후,취20μg양품상양우취병희태알응효전영(SDS-PAGE).취22μm공경초산섬유소막(NC막),전압100V,분별전전이15、30、60、90、120min.NC막용려춘홍염색,증류수표세후가입Cyt C일항、이항부육,방사자현영현색.결과:재전막과정중,수착시간적증가,전이도NC막적총단백증다;이Cyt C조대출현료선증가(30min),후감소,재증가(120min)적추세.결론:Cyt C수연시소분자량단백,단Western blot적전막시간병불수요감소,상반요증가도120min재능득도최가효과.
