遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2013年
4期
533-544
,共12页
类转录激活因子效应物核酸酶(TALEN)%斑马鱼%基因组定点突变%基因打靶%反向遗传学技术
類轉錄激活因子效應物覈痠酶(TALEN)%斑馬魚%基因組定點突變%基因打靶%反嚮遺傳學技術
류전록격활인자효응물핵산매(TALEN)%반마어%기인조정점돌변%기인타파%반향유전학기술
类转录激活因子效应物核酸酶(Transcription activator-like effector nuclease,TALEN)是最近发展起来的一类新型的人工核酸内切酶,它由特异性的TALE DNA 结合结构域和非特异性的FokⅠ核酸内切酶切割结构域组成.TALEN 能够根据用户需要切割特定的核苷酸靶序列,造成DNA 双链断裂,从而诱导该靶序列产生indel突变,目前已成功地应用于多个物种或体外培养细胞的基因组定点突变.文章介绍TALEN 靶点的选择与确认,采用"单元组装法"构建人工TALEN 的原理与步骤,以及通过显微注射TALEN mRNA 诱导并筛选斑马鱼突变体的实验流程与经验.这些方法理论上也适用于对其他物种进行基因打靶.
類轉錄激活因子效應物覈痠酶(Transcription activator-like effector nuclease,TALEN)是最近髮展起來的一類新型的人工覈痠內切酶,它由特異性的TALE DNA 結閤結構域和非特異性的FokⅠ覈痠內切酶切割結構域組成.TALEN 能夠根據用戶需要切割特定的覈苷痠靶序列,造成DNA 雙鏈斷裂,從而誘導該靶序列產生indel突變,目前已成功地應用于多箇物種或體外培養細胞的基因組定點突變.文章介紹TALEN 靶點的選擇與確認,採用"單元組裝法"構建人工TALEN 的原理與步驟,以及通過顯微註射TALEN mRNA 誘導併篩選斑馬魚突變體的實驗流程與經驗.這些方法理論上也適用于對其他物種進行基因打靶.
류전록격활인자효응물핵산매(Transcription activator-like effector nuclease,TALEN)시최근발전기래적일류신형적인공핵산내절매,타유특이성적TALE DNA 결합결구역화비특이성적FokⅠ핵산내절매절할결구역조성.TALEN 능구근거용호수요절할특정적핵감산파서렬,조성DNA 쌍련단렬,종이유도해파서렬산생indel돌변,목전이성공지응용우다개물충혹체외배양세포적기인조정점돌변.문장개소TALEN 파점적선택여학인,채용"단원조장법"구건인공TALEN 적원리여보취,이급통과현미주사TALEN mRNA 유도병사선반마어돌변체적실험류정여경험.저사방법이론상야괄용우대기타물충진행기인타파.
