山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2012年
44期
20-22,封2
,共4页
吴义高%肖戈%徐文清%黄福%胡卫列%王尉
吳義高%肖戈%徐文清%黃福%鬍衛列%王尉
오의고%초과%서문청%황복%호위렬%왕위
肾上腺皮质肿瘤%微小RNA%真核表达载体%miR-205
腎上腺皮質腫瘤%微小RNA%真覈錶達載體%miR-205
신상선피질종류%미소RNA%진핵표체재체%miR-205
目的 构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-miR-205,并使其在肾上腺皮质癌细胞SW-13中稳定表达.方法 依据miRbase数据库中pre-miR-205序列设计引物,PCR扩增pre-miR-205基因并将其克隆至线性化的pcDNA3.1(+)质粒中,获得重组表达载体pcDNA3.1(+)-miR-205,经双酶切及测序分析后,将其及对照空载体转染肾上腺皮质癌SW-13细胞,采用实时定量RCR法鉴定miR-205在SW-13细胞中表达.结果 酶切和测序结果均证实pcDNA3.1(+)-205重组质粒构建成功,经实时定量RCR检测表明转染pcDNA3.1(+)-205的SW-13细胞中miR-205阳性高表达.结论 真核表达载体pcDNA3.1(+)-205在SW-13中稳定转染,为进一步研究miR-205在肾上腺皮质癌细胞SW-13中的功能及基因调控机制奠定了实验基础.
目的 構建真覈錶達載體pcDNA3.1(+)-miR-205,併使其在腎上腺皮質癌細胞SW-13中穩定錶達.方法 依據miRbase數據庫中pre-miR-205序列設計引物,PCR擴增pre-miR-205基因併將其剋隆至線性化的pcDNA3.1(+)質粒中,穫得重組錶達載體pcDNA3.1(+)-miR-205,經雙酶切及測序分析後,將其及對照空載體轉染腎上腺皮質癌SW-13細胞,採用實時定量RCR法鑒定miR-205在SW-13細胞中錶達.結果 酶切和測序結果均證實pcDNA3.1(+)-205重組質粒構建成功,經實時定量RCR檢測錶明轉染pcDNA3.1(+)-205的SW-13細胞中miR-205暘性高錶達.結論 真覈錶達載體pcDNA3.1(+)-205在SW-13中穩定轉染,為進一步研究miR-205在腎上腺皮質癌細胞SW-13中的功能及基因調控機製奠定瞭實驗基礎.
목적 구건진핵표체재체pcDNA3.1(+)-miR-205,병사기재신상선피질암세포SW-13중은정표체.방법 의거miRbase수거고중pre-miR-205서렬설계인물,PCR확증pre-miR-205기인병장기극륭지선성화적pcDNA3.1(+)질립중,획득중조표체재체pcDNA3.1(+)-miR-205,경쌍매절급측서분석후,장기급대조공재체전염신상선피질암SW-13세포,채용실시정량RCR법감정miR-205재SW-13세포중표체.결과 매절화측서결과균증실pcDNA3.1(+)-205중조질립구건성공,경실시정량RCR검측표명전염pcDNA3.1(+)-205적SW-13세포중miR-205양성고표체.결론 진핵표체재체pcDNA3.1(+)-205재SW-13중은정전염,위진일보연구miR-205재신상선피질암세포SW-13중적공능급기인조공궤제전정료실험기출.
