山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2014年
11期
22-25
,共4页
转化生长因子β1%细胞凋亡%细胞周期%P27Kip1蛋白%Cyclin E蛋白%bcl-2蛋白
轉化生長因子β1%細胞凋亡%細胞週期%P27Kip1蛋白%Cyclin E蛋白%bcl-2蛋白
전화생장인자β1%세포조망%세포주기%P27Kip1단백%Cyclin E단백%bcl-2단백
transforming growth factor-β1%apoptosis%cell cycle%P27Kip1 protein%Cyclin E protein%bcl-2 protein
目的 观察外源性转化生长因子β1(TGF-β1)对原代急性早幼粒细胞白血病细胞(APL)凋亡的影响,并探讨其可能机制.方法 将APL细胞分为4组,对照组不加任何药物,实验组用终浓度为1、5、10 ng/mL TGF-β1处理(实验1、2、3组),分别处理24、48、72 h,采用瑞氏—吉姆萨染色法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期,免疫组化法检测TGF-β1、P27Kip1、Cyclin E、bcl-2蛋白,RT-PCR技术检测TGF-β1、P27Kip1、Cyclin E、bcl-2 mRNA.结果 与对照组比较,实验1、2、3组24、48 h细胞凋亡率升高(P均＜0.05);与同组24 h比较,实验1、2、3组48 h细胞凋亡率升高(P均＜0.05).对照组细胞培养48 h未见明显细胞周期阻滞;与对照组比较,实验1组48 h细胞周期阻滞于G1期,实验2、3组APL细胞周期明显阻滞于G1期.与对照组比较,实验2组TGF-β1、P27Kip1蛋白水平升高,Cyclin E、bcl-2蛋白降低(P均＜0.05).1'、2'β-actin条带亮度相同,实验2组(2道)P27Kip1 mRNA条带亮度与对照组(1道)相同,P27 Kip1 mRNA水平较对照组变化不明显;1'、2'β-actin条带亮度相同,实验2组(2道)条带亮度明显高于对照组(1道);实验2组Cyclin E条带与对照组比较亮度减低,Cyclin E表达下调.结论 外源性TGF-β1通过上调TGF-β1、P27 Kip1及下调Cyclin E、bcl-2作用,诱导细胞发生凋亡,使细胞阻滞于G1期.
目的 觀察外源性轉化生長因子β1(TGF-β1)對原代急性早幼粒細胞白血病細胞(APL)凋亡的影響,併探討其可能機製.方法 將APL細胞分為4組,對照組不加任何藥物,實驗組用終濃度為1、5、10 ng/mL TGF-β1處理(實驗1、2、3組),分彆處理24、48、72 h,採用瑞氏—吉姆薩染色法檢測細胞凋亡,流式細胞儀檢測細胞週期,免疫組化法檢測TGF-β1、P27Kip1、Cyclin E、bcl-2蛋白,RT-PCR技術檢測TGF-β1、P27Kip1、Cyclin E、bcl-2 mRNA.結果 與對照組比較,實驗1、2、3組24、48 h細胞凋亡率升高(P均＜0.05);與同組24 h比較,實驗1、2、3組48 h細胞凋亡率升高(P均＜0.05).對照組細胞培養48 h未見明顯細胞週期阻滯;與對照組比較,實驗1組48 h細胞週期阻滯于G1期,實驗2、3組APL細胞週期明顯阻滯于G1期.與對照組比較,實驗2組TGF-β1、P27Kip1蛋白水平升高,Cyclin E、bcl-2蛋白降低(P均＜0.05).1'、2'β-actin條帶亮度相同,實驗2組(2道)P27Kip1 mRNA條帶亮度與對照組(1道)相同,P27 Kip1 mRNA水平較對照組變化不明顯;1'、2'β-actin條帶亮度相同,實驗2組(2道)條帶亮度明顯高于對照組(1道);實驗2組Cyclin E條帶與對照組比較亮度減低,Cyclin E錶達下調.結論 外源性TGF-β1通過上調TGF-β1、P27 Kip1及下調Cyclin E、bcl-2作用,誘導細胞髮生凋亡,使細胞阻滯于G1期.
목적 관찰외원성전화생장인자β1(TGF-β1)대원대급성조유립세포백혈병세포(APL)조망적영향,병탐토기가능궤제.방법 장APL세포분위4조,대조조불가임하약물,실험조용종농도위1、5、10 ng/mL TGF-β1처리(실험1、2、3조),분별처리24、48、72 h,채용서씨—길모살염색법검측세포조망,류식세포의검측세포주기,면역조화법검측TGF-β1、P27Kip1、Cyclin E、bcl-2단백,RT-PCR기술검측TGF-β1、P27Kip1、Cyclin E、bcl-2 mRNA.결과 여대조조비교,실험1、2、3조24、48 h세포조망솔승고(P균＜0.05);여동조24 h비교,실험1、2、3조48 h세포조망솔승고(P균＜0.05).대조조세포배양48 h미견명현세포주기조체;여대조조비교,실험1조48 h세포주기조체우G1기,실험2、3조APL세포주기명현조체우G1기.여대조조비교,실험2조TGF-β1、P27Kip1단백수평승고,Cyclin E、bcl-2단백강저(P균＜0.05).1'、2'β-actin조대량도상동,실험2조(2도)P27Kip1 mRNA조대량도여대조조(1도)상동,P27 Kip1 mRNA수평교대조조변화불명현;1'、2'β-actin조대량도상동,실험2조(2도)조대량도명현고우대조조(1도);실험2조Cyclin E조대여대조조비교량도감저,Cyclin E표체하조.결론 외원성TGF-β1통과상조TGF-β1、P27 Kip1급하조Cyclin E、bcl-2작용,유도세포발생조망,사세포조체우G1기.
