山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2005年
35期
18-20
,共3页
韩雪飞%刘瑞敏%王永奎%景莹%贾敏%鄢文海%邢莹
韓雪飛%劉瑞敏%王永奎%景瑩%賈敏%鄢文海%邢瑩
한설비%류서민%왕영규%경형%가민%언문해%형형
绿色荧光蛋白%间充质干细胞%神经元
綠色熒光蛋白%間充質榦細胞%神經元
록색형광단백%간충질간세포%신경원
目的探讨增强型绿色荧光蛋白(EGFP)作为种子细胞标记物的可行性.方法构建EGFP逆转录病毒载体,转染豚鼠骨髓间充质干细胞(MSC),用阳离子脂质体介导法将病毒质粒导入HEK293包装细胞内.经G418筛选出阳性细胞克隆,取阳性克隆的病毒上清感染豚鼠骨MSC.筛选出稳定表达EGFP的MSC克隆,并向神经元方向诱导.检测神经元样细胞的特异性标志神经丝蛋白(NF)的表达.结果 EGFP的逆转录病毒载体成功构建.病毒上清转染豚鼠MSC后,EGFP能稳定表达1个月以上,并且MSC细胞诱导后能表达NF.结论 EGFP逆转录病毒载体易于构建成功并能在靶细胞中长期稳定表达,不影响细胞的分化特性,可以用作细胞标记.
目的探討增彊型綠色熒光蛋白(EGFP)作為種子細胞標記物的可行性.方法構建EGFP逆轉錄病毒載體,轉染豚鼠骨髓間充質榦細胞(MSC),用暘離子脂質體介導法將病毒質粒導入HEK293包裝細胞內.經G418篩選齣暘性細胞剋隆,取暘性剋隆的病毒上清感染豚鼠骨MSC.篩選齣穩定錶達EGFP的MSC剋隆,併嚮神經元方嚮誘導.檢測神經元樣細胞的特異性標誌神經絲蛋白(NF)的錶達.結果 EGFP的逆轉錄病毒載體成功構建.病毒上清轉染豚鼠MSC後,EGFP能穩定錶達1箇月以上,併且MSC細胞誘導後能錶達NF.結論 EGFP逆轉錄病毒載體易于構建成功併能在靶細胞中長期穩定錶達,不影響細胞的分化特性,可以用作細胞標記.
목적탐토증강형록색형광단백(EGFP)작위충자세포표기물적가행성.방법구건EGFP역전록병독재체,전염돈서골수간충질간세포(MSC),용양리자지질체개도법장병독질립도입HEK293포장세포내.경G418사선출양성세포극륭,취양성극륭적병독상청감염돈서골MSC.사선출은정표체EGFP적MSC극륭,병향신경원방향유도.검측신경원양세포적특이성표지신경사단백(NF)적표체.결과 EGFP적역전록병독재체성공구건.병독상청전염돈서MSC후,EGFP능은정표체1개월이상,병차MSC세포유도후능표체NF.결론 EGFP역전록병독재체역우구건성공병능재파세포중장기은정표체,불영향세포적분화특성,가이용작세포표기.
