山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2014年
28期
31-33
,共3页
肝肿瘤%DKK1%shRNA%腺病毒
肝腫瘤%DKK1%shRNA%腺病毒
간종류%DKK1%shRNA%선병독
目的：观察腺病毒介导的特异性抑制DKK1（ shDKK1）基因对原发性肝细胞癌（ HCC）细胞增殖的影响，并探讨其机制。方法设计合成3对DKK1基因的shRNA，筛选出最佳干扰片段，构建腺病毒载体Ad5．shDKK1。取对数生长期的人HCC细胞株SMMC-7721，分别转染Ad5．shDKK1（转染组）和Ad5．shCON（空载组）。采用MTT法检测细胞转染后24、48、72、96 h的相对增殖活力，采用Western blot法检测细胞Wnt信号通路中的β-链蛋白（β-catenin）、C-Myc、细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、增殖细胞核抗原（PCNA）。结果转染组转染后24、48、72、96 h的细胞相对增殖活力分别为133．65％±11．30％、169．41％±4．64％、251．39％±13．86％、336．70％±16．62％，空载组分别为94．65％±1．77％、98．01％±3．28％、93．80％±2．26％、93．41％±2．22％；两组同时间点比较，P均＜0．01。转染组β-catenin、C-Myc、Cyclin D1、PCNA 分别为568．59％±25．36％、351．26％±13．43％、295．35％±45．56％、125．35％±23．61％，空载组分别为102．23％±4．53％、98．65％±7．89％、101．35％±9．23％、97．65％±6．87％，P均＜0．05。结论腺病毒介导的shDKK1基因能促进HCC细胞增殖，可能与激活Wnt信号通路有关。
目的：觀察腺病毒介導的特異性抑製DKK1（ shDKK1）基因對原髮性肝細胞癌（ HCC）細胞增殖的影響，併探討其機製。方法設計閤成3對DKK1基因的shRNA，篩選齣最佳榦擾片段，構建腺病毒載體Ad5．shDKK1。取對數生長期的人HCC細胞株SMMC-7721，分彆轉染Ad5．shDKK1（轉染組）和Ad5．shCON（空載組）。採用MTT法檢測細胞轉染後24、48、72、96 h的相對增殖活力，採用Western blot法檢測細胞Wnt信號通路中的β-鏈蛋白（β-catenin）、C-Myc、細胞週期蛋白D1（Cyclin D1）、增殖細胞覈抗原（PCNA）。結果轉染組轉染後24、48、72、96 h的細胞相對增殖活力分彆為133．65％±11．30％、169．41％±4．64％、251．39％±13．86％、336．70％±16．62％，空載組分彆為94．65％±1．77％、98．01％±3．28％、93．80％±2．26％、93．41％±2．22％；兩組同時間點比較，P均＜0．01。轉染組β-catenin、C-Myc、Cyclin D1、PCNA 分彆為568．59％±25．36％、351．26％±13．43％、295．35％±45．56％、125．35％±23．61％，空載組分彆為102．23％±4．53％、98．65％±7．89％、101．35％±9．23％、97．65％±6．87％，P均＜0．05。結論腺病毒介導的shDKK1基因能促進HCC細胞增殖，可能與激活Wnt信號通路有關。
목적：관찰선병독개도적특이성억제DKK1（ shDKK1）기인대원발성간세포암（ HCC）세포증식적영향，병탐토기궤제。방법설계합성3대DKK1기인적shRNA，사선출최가간우편단，구건선병독재체Ad5．shDKK1。취대수생장기적인HCC세포주SMMC-7721，분별전염Ad5．shDKK1（전염조）화Ad5．shCON（공재조）。채용MTT법검측세포전염후24、48、72、96 h적상대증식활력，채용Western blot법검측세포Wnt신호통로중적β-련단백（β-catenin）、C-Myc、세포주기단백D1（Cyclin D1）、증식세포핵항원（PCNA）。결과전염조전염후24、48、72、96 h적세포상대증식활력분별위133．65％±11．30％、169．41％±4．64％、251．39％±13．86％、336．70％±16．62％，공재조분별위94．65％±1．77％、98．01％±3．28％、93．80％±2．26％、93．41％±2．22％；량조동시간점비교，P균＜0．01。전염조β-catenin、C-Myc、Cyclin D1、PCNA 분별위568．59％±25．36％、351．26％±13．43％、295．35％±45．56％、125．35％±23．61％，공재조분별위102．23％±4．53％、98．65％±7．89％、101．35％±9．23％、97．65％±6．87％，P균＜0．05。결론선병독개도적shDKK1기인능촉진HCC세포증식，가능여격활Wnt신호통로유관。
