山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2015年
6期
28-30
,共3页
高彦琳%张宁坤%陈厚良%高连如%朱智明
高彥琳%張寧坤%陳厚良%高連如%硃智明
고언림%장저곤%진후량%고련여%주지명
间充质干细胞%脐带%细胞培养
間充質榦細胞%臍帶%細胞培養
간충질간세포%제대%세포배양
目的:探讨人脐带来源间充质干细胞( hUC-MSCs )体外培养的最佳方法。方法采用组织块贴壁法分离培养hUC-MSCs ,记为初次培养组。将原代培养瓶中的培养液及组织离心,重新分成再次培养组织组、再次培养混合组和再次培养纯液组进行再次培养。观察四组原代细胞的细胞形态、获得时间和细胞得率;MTT法绘制细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞周期及免疫表型。结果初次培养组、再次培养组织组、再次培养混合组、再次培养纯液组获取细胞的平均时间分别为(15±0.45)d、(7±0.30)d、(8±0.25)d、(8±0.25)d。每个T75培养瓶可获取的第1代细胞数分别为(4.0±0.50)×105、(9.0±0.55)×105、(15.0±0.20)×105、(7.0±0.33)×105个。倒置显微镜下观察四组细胞为形态相对均一的梭形贴壁细胞,呈平行排列生长或旋涡状生长。四组细胞的生长曲线、增殖活性、表面标记物检测均无明显差异。结论对脐带间充质干细胞的原代培养体系进行再次培养,可在短时间内扩增出大量原代细胞。
目的:探討人臍帶來源間充質榦細胞( hUC-MSCs )體外培養的最佳方法。方法採用組織塊貼壁法分離培養hUC-MSCs ,記為初次培養組。將原代培養瓶中的培養液及組織離心,重新分成再次培養組織組、再次培養混閤組和再次培養純液組進行再次培養。觀察四組原代細胞的細胞形態、穫得時間和細胞得率;MTT法繪製細胞生長麯線,流式細胞儀檢測細胞週期及免疫錶型。結果初次培養組、再次培養組織組、再次培養混閤組、再次培養純液組穫取細胞的平均時間分彆為(15±0.45)d、(7±0.30)d、(8±0.25)d、(8±0.25)d。每箇T75培養瓶可穫取的第1代細胞數分彆為(4.0±0.50)×105、(9.0±0.55)×105、(15.0±0.20)×105、(7.0±0.33)×105箇。倒置顯微鏡下觀察四組細胞為形態相對均一的梭形貼壁細胞,呈平行排列生長或鏇渦狀生長。四組細胞的生長麯線、增殖活性、錶麵標記物檢測均無明顯差異。結論對臍帶間充質榦細胞的原代培養體繫進行再次培養,可在短時間內擴增齣大量原代細胞。
목적:탐토인제대래원간충질간세포( hUC-MSCs )체외배양적최가방법。방법채용조직괴첩벽법분리배양hUC-MSCs ,기위초차배양조。장원대배양병중적배양액급조직리심,중신분성재차배양조직조、재차배양혼합조화재차배양순액조진행재차배양。관찰사조원대세포적세포형태、획득시간화세포득솔;MTT법회제세포생장곡선,류식세포의검측세포주기급면역표형。결과초차배양조、재차배양조직조、재차배양혼합조、재차배양순액조획취세포적평균시간분별위(15±0.45)d、(7±0.30)d、(8±0.25)d、(8±0.25)d。매개T75배양병가획취적제1대세포수분별위(4.0±0.50)×105、(9.0±0.55)×105、(15.0±0.20)×105、(7.0±0.33)×105개。도치현미경하관찰사조세포위형태상대균일적사형첩벽세포,정평행배렬생장혹선와상생장。사조세포적생장곡선、증식활성、표면표기물검측균무명현차이。결론대제대간충질간세포적원대배양체계진행재차배양,가재단시간내확증출대량원대세포。