遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2004年
5期
777-781
,共5页
柳李旺%龚义勤%黄浩%朱献文
柳李旺%龔義勤%黃浩%硃獻文
류리왕%공의근%황호%주헌문
SRAP%TRAP%分子标记
SRAP%TRAP%分子標記
SRAP%TRAP%분자표기
SRAP与TRAP是最近发展的新型分子标记系统,具有简单、高效、高共显性、重复性、易测序等优点,尤其是可检测基因的可译框(ORFs)区域.本文对分别在芸薹属作物与向日葵中开发的SRAP、TRAP标记系统的基本原理与分析程序进行介绍.引物设计是SRAP与TRAP分析的关键,目前已开发出多个SRAP正、反向引物;与SRAP标记技术无须任何序列信息不同,TRAP技术需要基于已知cDNA 或EST序列信息设计固定引物才可进行PCR扩增;二者PCR条件采用复性变温法,前5个循环复性温度为35℃,后30～35个循环为50℃;扩增产物可在聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶上电泳,同位素或银染、EB检测.目前这两种标记系统已开始在多种作物的种质资源鉴定评价、遗传图谱构建(包括转录图谱)、重要性状标记乃至基因分离克隆等方面成功应用.
SRAP與TRAP是最近髮展的新型分子標記繫統,具有簡單、高效、高共顯性、重複性、易測序等優點,尤其是可檢測基因的可譯框(ORFs)區域.本文對分彆在蕓薹屬作物與嚮日葵中開髮的SRAP、TRAP標記繫統的基本原理與分析程序進行介紹.引物設計是SRAP與TRAP分析的關鍵,目前已開髮齣多箇SRAP正、反嚮引物;與SRAP標記技術無鬚任何序列信息不同,TRAP技術需要基于已知cDNA 或EST序列信息設計固定引物纔可進行PCR擴增;二者PCR條件採用複性變溫法,前5箇循環複性溫度為35℃,後30～35箇循環為50℃;擴增產物可在聚丙烯酰胺或瓊脂糖凝膠上電泳,同位素或銀染、EB檢測.目前這兩種標記繫統已開始在多種作物的種質資源鑒定評價、遺傳圖譜構建(包括轉錄圖譜)、重要性狀標記迺至基因分離剋隆等方麵成功應用.
SRAP여TRAP시최근발전적신형분자표기계통,구유간단、고효、고공현성、중복성、역측서등우점,우기시가검측기인적가역광(ORFs)구역.본문대분별재예대속작물여향일규중개발적SRAP、TRAP표기계통적기본원리여분석정서진행개소.인물설계시SRAP여TRAP분석적관건,목전이개발출다개SRAP정、반향인물;여SRAP표기기술무수임하서렬신식불동,TRAP기술수요기우이지cDNA 혹EST서렬신식설계고정인물재가진행PCR확증;이자PCR조건채용복성변온법,전5개순배복성온도위35℃,후30～35개순배위50℃;확증산물가재취병희선알혹경지당응효상전영,동위소혹은염、EB검측.목전저량충표기계통이개시재다충작물적충질자원감정평개、유전도보구건(포괄전록도보)、중요성상표기내지기인분리극륭등방면성공응용.
