山东医药
山東醫藥
산동의약
Shandong Medical Journal
2015年
43期
26-28
,共3页
李海芳%苏卫东%刘传丽%徐晨%邱丽君
李海芳%囌衛東%劉傳麗%徐晨%邱麗君
리해방%소위동%류전려%서신%구려군
胎盘生长因子%基因沿默%脂多糖%动脉粥样硬化%人脐静脉内皮细胞%炎性因子
胎盤生長因子%基因沿默%脂多糖%動脈粥樣硬化%人臍靜脈內皮細胞%炎性因子
태반생장인자%기인연묵%지다당%동맥죽양경화%인제정맥내피세포%염성인자
目的:观察沉默胎盘生长因子( PGF)基因对脂多糖( LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞( HUVECs)炎性因子表达的影响。方法体外培养HUVECs细胞至第3代,分为A、B、C、D、E组。 A组转染siRNA-NC质粒(为非特异性沉默对照质粒),B组转染siRNA-PGF质粒,C组转染siRNA-NC+pcDNA3质粒(为NF-κB过表达对照质粒), D组转染siRNA-PGF+pcDNA3质粒, E组转染 siRNA-PGF+pcDNA3-NF-κB质粒。上述各组转染24 h后与100 ng/mL的LPS共孵育24 h,收集各组细胞及细胞上清液,分别用于相关细胞因子mRNA(实时荧光定量PCR法)及蛋白( ELISA法)的检测。结果与A组相比,B组MCP-1、IL-1、IL-6、TNF-α、NF-κB mRNA和蛋白的表达均明显下降,两组相比,P均<0.05。与D组相比,E组MCP-1、IL-1、TNF-α mRNA和蛋白的表达均上升,两组相比,P均<0.05。结论沉默PGF基因可以通过NF-κB信号通路的介导在mRNA和蛋白水平上抑制HUVECs炎症因子MCP-1、IL-1、TNF-α的表达,从而减轻炎症反应。
目的:觀察沉默胎盤生長因子( PGF)基因對脂多糖( LPS)誘導的人臍靜脈內皮細胞( HUVECs)炎性因子錶達的影響。方法體外培養HUVECs細胞至第3代,分為A、B、C、D、E組。 A組轉染siRNA-NC質粒(為非特異性沉默對照質粒),B組轉染siRNA-PGF質粒,C組轉染siRNA-NC+pcDNA3質粒(為NF-κB過錶達對照質粒), D組轉染siRNA-PGF+pcDNA3質粒, E組轉染 siRNA-PGF+pcDNA3-NF-κB質粒。上述各組轉染24 h後與100 ng/mL的LPS共孵育24 h,收集各組細胞及細胞上清液,分彆用于相關細胞因子mRNA(實時熒光定量PCR法)及蛋白( ELISA法)的檢測。結果與A組相比,B組MCP-1、IL-1、IL-6、TNF-α、NF-κB mRNA和蛋白的錶達均明顯下降,兩組相比,P均<0.05。與D組相比,E組MCP-1、IL-1、TNF-α mRNA和蛋白的錶達均上升,兩組相比,P均<0.05。結論沉默PGF基因可以通過NF-κB信號通路的介導在mRNA和蛋白水平上抑製HUVECs炎癥因子MCP-1、IL-1、TNF-α的錶達,從而減輕炎癥反應。
목적:관찰침묵태반생장인자( PGF)기인대지다당( LPS)유도적인제정맥내피세포( HUVECs)염성인자표체적영향。방법체외배양HUVECs세포지제3대,분위A、B、C、D、E조。 A조전염siRNA-NC질립(위비특이성침묵대조질립),B조전염siRNA-PGF질립,C조전염siRNA-NC+pcDNA3질립(위NF-κB과표체대조질립), D조전염siRNA-PGF+pcDNA3질립, E조전염 siRNA-PGF+pcDNA3-NF-κB질립。상술각조전염24 h후여100 ng/mL적LPS공부육24 h,수집각조세포급세포상청액,분별용우상관세포인자mRNA(실시형광정량PCR법)급단백( ELISA법)적검측。결과여A조상비,B조MCP-1、IL-1、IL-6、TNF-α、NF-κB mRNA화단백적표체균명현하강,량조상비,P균<0.05。여D조상비,E조MCP-1、IL-1、TNF-α mRNA화단백적표체균상승,량조상비,P균<0.05。결론침묵PGF기인가이통과NF-κB신호통로적개도재mRNA화단백수평상억제HUVECs염증인자MCP-1、IL-1、TNF-α적표체,종이감경염증반응。