分析化学
分析化學
분석화학
Chinese Journal of Analytical Chemistry
2015年
10期
1551-1557
,共7页
刘喜东%丛宇婷%胡良海%张养军%顾景凯%钱小红
劉喜東%叢宇婷%鬍良海%張養軍%顧景凱%錢小紅
류희동%총우정%호량해%장양군%고경개%전소홍
稳定同位素标记肽段%绝对定量%酶切位点%药物代谢酶
穩定同位素標記肽段%絕對定量%酶切位點%藥物代謝酶
은정동위소표기태단%절대정량%매절위점%약물대사매
Stable isotope labeling peptide%Absolute quantitation%Cleavage site%Drug metabolizing enzymes
利用带有酶切位点的稳定同位素标记肽段作内标,采取3种方式处理样品,考察了不同的样品处理过程对实验结果准确性的影响.首先合成不同长度的带有酶切位点的肽段,考察其酶解过程,实验结果表明,胰蛋白酶的活性位点具有一定的选择性,最终确定目标肽段两端分别加入3个氨基酸所形成的肽段为内标.分别采用在酶解前加入带酶切位点的稳定同位素标记肽段、不带酶切位点的稳定同位素标记肽段以及在酶解过程后、质谱检测前加入不带酶切位点的稳定同位素标记肽段3种方式处理样品.结果表明,采取第一种方式处理样品的测定结果更接近真实值,相对偏差范围更小,可减小蛋白质绝对定量分析的误差,提高分析结果的重现性.
利用帶有酶切位點的穩定同位素標記肽段作內標,採取3種方式處理樣品,攷察瞭不同的樣品處理過程對實驗結果準確性的影響.首先閤成不同長度的帶有酶切位點的肽段,攷察其酶解過程,實驗結果錶明,胰蛋白酶的活性位點具有一定的選擇性,最終確定目標肽段兩耑分彆加入3箇氨基痠所形成的肽段為內標.分彆採用在酶解前加入帶酶切位點的穩定同位素標記肽段、不帶酶切位點的穩定同位素標記肽段以及在酶解過程後、質譜檢測前加入不帶酶切位點的穩定同位素標記肽段3種方式處理樣品.結果錶明,採取第一種方式處理樣品的測定結果更接近真實值,相對偏差範圍更小,可減小蛋白質絕對定量分析的誤差,提高分析結果的重現性.
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