石蜡包埋乳腺癌组织的RNA提取及基因表达研究
석사포매유선암조직적RNA제취급기인표체연구
RNA extraction and gene expression of paraffin-embedded breast cancer samples
  • 万方数据
    山东医药 산동의약
    SHANDONG MEDICAL JOURNAL
    2009年 12期 15-17 ,共3页

    孙冰%郭晓红%张利利%张峰%吴世凯%宋三泰%江泽飞%王敦梅%苏敏

    손빙%곽효홍%장리리%장봉%오세개%송삼태%강택비%왕돈매%소민

    石蜡包埋组织%RNA提取%实时逆转录聚合酶链反应%基因表达 石蠟包埋組織%RNA提取%實時逆轉錄聚閤酶鏈反應%基因錶達
    석사포매조직%RNA제취%실시역전록취합매련반응%기인표체
    目的 探索从石蜡包埋乳腺癌样本中提取总RNA的质量和产量,并检测其基因的表达情况.方法 收集保存时间1～17 a不等的人乳腺癌石蜡组织样本153例,取5 μm厚切片1～15张,用Roche和Ambion两种试剂盒提取总RNA.采用随机引物将mRNA反转录为cDNA,SYBR Green Ⅰ染料法实时荧光定量PCR分析ACTB、GAPDH、RPLPO和GUSB管家基因mRNA的表达情况.结果 153例标本总RNA浓度在3～375 ng/μl范围,总产量0.18～18.5 μg,A260/280值在1.32～2.07范围,RNA琼脂糖凝胶电泳片段弥散在100～1 000 bp之间.81例样本的4个管家基因的平均Ct值在24～30范围,随着样本保存时间的延长,Ct值也逐渐增加.结论 从石蜡包埋样品标本中提取的RNA产量及质量可满足实验的要求,总RNA有所降解,但可以进行目的 基因mRNA的检测, 保存10 a以上的样本也能够进行基因表达研究,在基础研究和临床实践方面具有广阔的应用价值.
    목적 탐색종석사포매유선암양본중제취총RNA적질량화산량,병검측기기인적표체정황.방법 수집보존시간1～17 a불등적인유선암석사조직양본153례,취5 μm후절편1～15장,용Roche화Ambion량충시제합제취총RNA.채용수궤인물장mRNA반전록위cDNA,SYBR Green Ⅰ염료법실시형광정량PCR분석ACTB、GAPDH、RPLPO화GUSB관가기인mRNA적표체정황.결과 153례표본총RNA농도재3～375 ng/μl범위,총산량0.18～18.5 μg,A260/280치재1.32～2.07범위,RNA경지당응효전영편단미산재100～1 000 bp지간.81례양본적4개관가기인적평균Ct치재24～30범위,수착양본보존시간적연장,Ct치야축점증가.결론 종석사포매양품표본중제취적RNA산량급질량가만족실험적요구,총RNA유소강해,단가이진행목적 기인mRNA적검측, 보존10 a이상적양본야능구진행기인표체연구,재기출연구화림상실천방면구유엄활적응용개치.
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