现代中西医结合杂志
現代中西醫結閤雜誌
현대중서의결합잡지
MODERN JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL CHINESE AND WESTERN MEDICINE
2008年
30期
4667-4668,4693
,共3页
朱美华%温红艳%唐普润%梁敏%刘启才
硃美華%溫紅豔%唐普潤%樑敏%劉啟纔
주미화%온홍염%당보윤%량민%류계재
RNA干扰%p38MAPK%逆转录病毒表达载体
RNA榦擾%p38MAPK%逆轉錄病毒錶達載體
RNA간우%p38MAPK%역전록병독표체재체
目的 构建沉默人p38MAPK基因表达的RNA干扰的逆转录病毒表达载体.方法 查找人p 38MAPK cDNA序列,利用软件设计并合成能够形成互补双链并能转录出靶向人p38MAPK基因的 短发夹状RNA的两条寡核苷酸序列,退火后连接至线性化载体pSIREN上,获得重组质粒pSIRE N-p38MAPK,酶切和测序进行鉴定.结果 双酶切重组质粒获得特定的酶切图谱,证实所合成核酸片段的正确重组;测序结果显示重组核酸片段序列与设计的序列完全相同.结论 成功构建了沉默人p38MAPK基因的重组质粒pSIREN-p38MAPK.
目的 構建沉默人p38MAPK基因錶達的RNA榦擾的逆轉錄病毒錶達載體.方法 查找人p 38MAPK cDNA序列,利用軟件設計併閤成能夠形成互補雙鏈併能轉錄齣靶嚮人p38MAPK基因的 短髮夾狀RNA的兩條寡覈苷痠序列,退火後連接至線性化載體pSIREN上,穫得重組質粒pSIRE N-p38MAPK,酶切和測序進行鑒定.結果 雙酶切重組質粒穫得特定的酶切圖譜,證實所閤成覈痠片段的正確重組;測序結果顯示重組覈痠片段序列與設計的序列完全相同.結論 成功構建瞭沉默人p38MAPK基因的重組質粒pSIREN-p38MAPK.
목적 구건침묵인p38MAPK기인표체적RNA간우적역전록병독표체재체.방법 사조인p 38MAPK cDNA서렬,이용연건설계병합성능구형성호보쌍련병능전록출파향인p38MAPK기인적 단발협상RNA적량조과핵감산서렬,퇴화후련접지선성화재체pSIREN상,획득중조질립pSIRE N-p38MAPK,매절화측서진행감정.결과 쌍매절중조질립획득특정적매절도보,증실소합성핵산편단적정학중조;측서결과현시중조핵산편단서렬여설계적서렬완전상동.결론 성공구건료침묵인p38MAPK기인적중조질립pSIREN-p38MAPK.