遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2011年
2期
168-174
,共7页
殷勤%彭金霞%崔亮%谢达祥%王志伟%李奎%陈晓汉
慇勤%彭金霞%崔亮%謝達祥%王誌偉%李奎%陳曉漢
은근%팽금하%최량%사체상%왕지위%리규%진효한
凡纳滨对虾%TCP-1-eta%SNP%耐寒性状
凡納濱對蝦%TCP-1-eta%SNP%耐寒性狀
범납빈대하%TCP-1-eta%SNP%내한성상
为研究凡纳滨对虾耐寒性状的分子机理,文章克隆了凡纳滨对虾的耐寒相关基因TCP-1-eta并对其与耐寒性状的关系进行了研究.首先,根据电子克隆所得序列设计引物,采用RT-PCR方法克隆得到长1 705bp的TCP-1-eta基因序列,其中包括1 629 bp的完整开放阅读框,编码542个氨基酸残基.然后,运用荧光定量PCR对TCP-1-eta墓因进行时空表达谱的分析:(1)组织表达分析结果显示,该基因在凡纳滨对虾肌肉组织中表达量最高;(2)不同低温处理下的表达结果显示,该基因在15℃开始呈上调表达,13℃时表达量最高;(3)13℃低温处理的表达结果显示,该基因在36 h内呈小幅上调表达,但 36 h后表达量显著升高,48 h表达量达到0h的150倍.进一步采用PCR-RFLP方法对216只凡纳滨对虾TCP-1-eta基因进行了SNP多态性检测,并将其与耐寒性状进行了关联分析.在该基因编码区第731碱墓上发现C/T突变,方差分析结果表明该位点的不同基因型与耐寒力指标CDH (Cooling-degree hours)值相关(P < 0.05),其中CC基因型的耐寒能力比TT基因型强.
為研究凡納濱對蝦耐寒性狀的分子機理,文章剋隆瞭凡納濱對蝦的耐寒相關基因TCP-1-eta併對其與耐寒性狀的關繫進行瞭研究.首先,根據電子剋隆所得序列設計引物,採用RT-PCR方法剋隆得到長1 705bp的TCP-1-eta基因序列,其中包括1 629 bp的完整開放閱讀框,編碼542箇氨基痠殘基.然後,運用熒光定量PCR對TCP-1-eta墓因進行時空錶達譜的分析:(1)組織錶達分析結果顯示,該基因在凡納濱對蝦肌肉組織中錶達量最高;(2)不同低溫處理下的錶達結果顯示,該基因在15℃開始呈上調錶達,13℃時錶達量最高;(3)13℃低溫處理的錶達結果顯示,該基因在36 h內呈小幅上調錶達,但 36 h後錶達量顯著升高,48 h錶達量達到0h的150倍.進一步採用PCR-RFLP方法對216隻凡納濱對蝦TCP-1-eta基因進行瞭SNP多態性檢測,併將其與耐寒性狀進行瞭關聯分析.在該基因編碼區第731堿墓上髮現C/T突變,方差分析結果錶明該位點的不同基因型與耐寒力指標CDH (Cooling-degree hours)值相關(P < 0.05),其中CC基因型的耐寒能力比TT基因型彊.
위연구범납빈대하내한성상적분자궤리,문장극륭료범납빈대하적내한상관기인TCP-1-eta병대기여내한성상적관계진행료연구.수선,근거전자극륭소득서렬설계인물,채용RT-PCR방법극륭득도장1 705bp적TCP-1-eta기인서렬,기중포괄1 629 bp적완정개방열독광,편마542개안기산잔기.연후,운용형광정량PCR대TCP-1-eta묘인진행시공표체보적분석:(1)조직표체분석결과현시,해기인재범납빈대하기육조직중표체량최고;(2)불동저온처리하적표체결과현시,해기인재15℃개시정상조표체,13℃시표체량최고;(3)13℃저온처리적표체결과현시,해기인재36 h내정소폭상조표체,단 36 h후표체량현저승고,48 h표체량체도0h적150배.진일보채용PCR-RFLP방법대216지범납빈대하TCP-1-eta기인진행료SNP다태성검측,병장기여내한성상진행료관련분석.재해기인편마구제731감묘상발현C/T돌변,방차분석결과표명해위점적불동기인형여내한력지표CDH (Cooling-degree hours)치상관(P < 0.05),기중CC기인형적내한능력비TT기인형강.
