山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2009年
19期
48-49
,共2页
邓郁青%张坤娟%王从印%张征峥%宋小天%张红中%王润田
鄧鬱青%張坤娟%王從印%張徵崢%宋小天%張紅中%王潤田
산욱청%장곤연%왕종인%장정쟁%송소천%장홍중%왕윤전
人类免疫缺陷病毒-1%HIV包膜蛋白质gp41%单克隆抗体%双抗体夹心ELISA
人類免疫缺陷病毒-1%HIV包膜蛋白質gp41%單剋隆抗體%雙抗體夾心ELISA
인류면역결함병독-1%HIV포막단백질gp41%단극륭항체%쌍항체협심ELISA
目的 为HIV-1感染的检测和研究提供依据.方法 以基因工程重组抗原HIV-1 gp41蛋白免疫BALB/c小鼠,利用常规杂交瘤技术和间接ELISA法制备抗gp41蛋白的单克隆抗体(mAb),用ELISA法鉴定所得mAb的Ig亚类、效价及特异性.单抗经饱和硫酸铵(SAS)纯化和HRP标记后,利用双抗体夹心ELISA筛选检测gp41蛋白的最佳配伍单抗,分别包被ELISA板及作为酶标mAb,建立双mAb夹心ELISA法.结果 经细胞融合、筛选、克隆化,获得了12株可分泌高效价mAb的杂交瘤细胞.纯化的腹水mAb经配对试验,选出2株mAb:7D4和9G2-HRP建立了双mAb夹心ELISA法,检测HIV-1 gp41抗原的灵敏度是1 μg/L.结论 获得12株效价高的抗HIV-1 gp41的mAb,建立了特异性强、灵敏度较高的检测HIV-1 gp41抗原的双抗体夹心ELISA法.
目的 為HIV-1感染的檢測和研究提供依據.方法 以基因工程重組抗原HIV-1 gp41蛋白免疫BALB/c小鼠,利用常規雜交瘤技術和間接ELISA法製備抗gp41蛋白的單剋隆抗體(mAb),用ELISA法鑒定所得mAb的Ig亞類、效價及特異性.單抗經飽和硫痠銨(SAS)純化和HRP標記後,利用雙抗體夾心ELISA篩選檢測gp41蛋白的最佳配伍單抗,分彆包被ELISA闆及作為酶標mAb,建立雙mAb夾心ELISA法.結果 經細胞融閤、篩選、剋隆化,穫得瞭12株可分泌高效價mAb的雜交瘤細胞.純化的腹水mAb經配對試驗,選齣2株mAb:7D4和9G2-HRP建立瞭雙mAb夾心ELISA法,檢測HIV-1 gp41抗原的靈敏度是1 μg/L.結論 穫得12株效價高的抗HIV-1 gp41的mAb,建立瞭特異性彊、靈敏度較高的檢測HIV-1 gp41抗原的雙抗體夾心ELISA法.
목적 위HIV-1감염적검측화연구제공의거.방법 이기인공정중조항원HIV-1 gp41단백면역BALB/c소서,이용상규잡교류기술화간접ELISA법제비항gp41단백적단극륭항체(mAb),용ELISA법감정소득mAb적Ig아류、효개급특이성.단항경포화류산안(SAS)순화화HRP표기후,이용쌍항체협심ELISA사선검측gp41단백적최가배오단항,분별포피ELISA판급작위매표mAb,건립쌍mAb협심ELISA법.결과 경세포융합、사선、극륭화,획득료12주가분비고효개mAb적잡교류세포.순화적복수mAb경배대시험,선출2주mAb:7D4화9G2-HRP건립료쌍mAb협심ELISA법,검측HIV-1 gp41항원적령민도시1 μg/L.결론 획득12주효개고적항HIV-1 gp41적mAb,건립료특이성강、령민도교고적검측HIV-1 gp41항원적쌍항체협심ELISA법.
