分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2007年
2期
161-165
,共5页
钱林艺%应万涛%刘新%卢庄%蔡耘%何建勇%钱小红
錢林藝%應萬濤%劉新%盧莊%蔡耘%何建勇%錢小紅
전림예%응만도%류신%로장%채운%하건용%전소홍
稳定同位素标记%18O%定量蛋白质组学%质谱%液相色谱
穩定同位素標記%18O%定量蛋白質組學%質譜%液相色譜
은정동위소표기%18O%정량단백질조학%질보%액상색보
建立了18O稳定同位素标记方法,用于复杂体系蛋白质相对定量分析.对影响蛋白质标记稳定性的实验条件进行了比较和优化.结果表明,采用酶切后标记的方法,酶切肽段在胰酶催化下,在pH 5.0的K2HPO4/KH2PO4缓冲体系中,37℃18O标记反应16 h,绝大部分肽段即可达到100%的标记效率.对多个16 O/18O 成对肽段峰强度的动态范围及定量准确度进行了考察.结果表明,18O标记方法是一种简便、稳定、可靠的相对定量方法,10倍动态范围内,标记率相对标准偏差在18.4%以内,16 O/18O峰强度呈很好的线性关系.本实验考察了标记后的肽段在不同溶液体系中的稳定性,为复杂样品的预处理和预分离的溶液条件提供了依据.
建立瞭18O穩定同位素標記方法,用于複雜體繫蛋白質相對定量分析.對影響蛋白質標記穩定性的實驗條件進行瞭比較和優化.結果錶明,採用酶切後標記的方法,酶切肽段在胰酶催化下,在pH 5.0的K2HPO4/KH2PO4緩遲體繫中,37℃18O標記反應16 h,絕大部分肽段即可達到100%的標記效率.對多箇16 O/18O 成對肽段峰彊度的動態範圍及定量準確度進行瞭攷察.結果錶明,18O標記方法是一種簡便、穩定、可靠的相對定量方法,10倍動態範圍內,標記率相對標準偏差在18.4%以內,16 O/18O峰彊度呈很好的線性關繫.本實驗攷察瞭標記後的肽段在不同溶液體繫中的穩定性,為複雜樣品的預處理和預分離的溶液條件提供瞭依據.
건립료18O은정동위소표기방법,용우복잡체계단백질상대정량분석.대영향단백질표기은정성적실험조건진행료비교화우화.결과표명,채용매절후표기적방법,매절태단재이매최화하,재pH 5.0적K2HPO4/KH2PO4완충체계중,37℃18O표기반응16 h,절대부분태단즉가체도100%적표기효솔.대다개16 O/18O 성대태단봉강도적동태범위급정량준학도진행료고찰.결과표명,18O표기방법시일충간편、은정、가고적상대정량방법,10배동태범위내,표기솔상대표준편차재18.4%이내,16 O/18O봉강도정흔호적선성관계.본실험고찰료표기후적태단재불동용액체계중적은정성,위복잡양품적예처리화예분리적용액조건제공료의거.
