现代中西医结合杂志
現代中西醫結閤雜誌
현대중서의결합잡지
MODERN JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL CHINESE AND WESTERN MEDICINE
2012年
24期
2642-2645,2691
,共5页
地塞米松%骨髓间充质干细胞%成骨细胞%大白兔
地塞米鬆%骨髓間充質榦細胞%成骨細胞%大白兔
지새미송%골수간충질간세포%성골세포%대백토
目的 探讨兔骨髓间充质干细胞(MSCs)体外定向诱导分化为成骨细胞所需的地塞米松的最佳浓度.方法 抽取兔骨髓,采用全骨髓贴壁培养法体外培养,贴壁细胞进行传代.取第3代细胞,随机分为5组,在培养基中添加成骨分化诱导剂β-甘油磷酸钠、L-抗坏血酸,5组添加的地塞米松的浓度分别为1×10-6mol/L、1×10-7mol/L、1×10-8mol/L、1×10-9mol/L、1×10-10mol/L.培养10d后,在倒置显微镜观察细胞形态,计算细胞浓度,采用5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸盐(BCIP)/氯化硝基四氮唑蓝(NBT)底物显色试剂检测碱性磷酸酶(ALP),茜素红染色检测钙结节.结果 较高浓度(1×10-8mol/L、1×10-7mol/L、1×10-6mol/L)的地塞米松相对于较低浓度(1×10-9mol/L、1×10-10mol/L)的地塞米松可显著增加ALP表达(P均<0.05),并可增加钙结节的形成;1×10-9mol/L及其以下浓度的地塞米松对细胞增殖无明显影响(P均>0.05),1×10-7mol/L以上浓度的地塞米松可明显抑制细胞的增殖(P<0.01).结论 地塞米松在体外定向诱导分化兔骨髓间充质干细胞为成骨细胞,最佳的浓度为1×10-8mol/L.
目的 探討兔骨髓間充質榦細胞(MSCs)體外定嚮誘導分化為成骨細胞所需的地塞米鬆的最佳濃度.方法 抽取兔骨髓,採用全骨髓貼壁培養法體外培養,貼壁細胞進行傳代.取第3代細胞,隨機分為5組,在培養基中添加成骨分化誘導劑β-甘油燐痠鈉、L-抗壞血痠,5組添加的地塞米鬆的濃度分彆為1×10-6mol/L、1×10-7mol/L、1×10-8mol/L、1×10-9mol/L、1×10-10mol/L.培養10d後,在倒置顯微鏡觀察細胞形態,計算細胞濃度,採用5-溴-4-氯-3-吲哚燐痠鹽(BCIP)/氯化硝基四氮唑藍(NBT)底物顯色試劑檢測堿性燐痠酶(ALP),茜素紅染色檢測鈣結節.結果 較高濃度(1×10-8mol/L、1×10-7mol/L、1×10-6mol/L)的地塞米鬆相對于較低濃度(1×10-9mol/L、1×10-10mol/L)的地塞米鬆可顯著增加ALP錶達(P均<0.05),併可增加鈣結節的形成;1×10-9mol/L及其以下濃度的地塞米鬆對細胞增殖無明顯影響(P均>0.05),1×10-7mol/L以上濃度的地塞米鬆可明顯抑製細胞的增殖(P<0.01).結論 地塞米鬆在體外定嚮誘導分化兔骨髓間充質榦細胞為成骨細胞,最佳的濃度為1×10-8mol/L.
목적 탐토토골수간충질간세포(MSCs)체외정향유도분화위성골세포소수적지새미송적최가농도.방법 추취토골수,채용전골수첩벽배양법체외배양,첩벽세포진행전대.취제3대세포,수궤분위5조,재배양기중첨가성골분화유도제β-감유린산납、L-항배혈산,5조첨가적지새미송적농도분별위1×10-6mol/L、1×10-7mol/L、1×10-8mol/L、1×10-9mol/L、1×10-10mol/L.배양10d후,재도치현미경관찰세포형태,계산세포농도,채용5-추-4-록-3-신타린산염(BCIP)/록화초기사담서람(NBT)저물현색시제검측감성린산매(ALP),천소홍염색검측개결절.결과 교고농도(1×10-8mol/L、1×10-7mol/L、1×10-6mol/L)적지새미송상대우교저농도(1×10-9mol/L、1×10-10mol/L)적지새미송가현저증가ALP표체(P균<0.05),병가증가개결절적형성;1×10-9mol/L급기이하농도적지새미송대세포증식무명현영향(P균>0.05),1×10-7mol/L이상농도적지새미송가명현억제세포적증식(P<0.01).결론 지새미송재체외정향유도분화토골수간충질간세포위성골세포,최가적농도위1×10-8mol/L.