山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2011年
35期
3-5
,共3页
熊建光%李湘楚%何小飞%于红刚
熊建光%李湘楚%何小飛%于紅剛
웅건광%리상초%하소비%우홍강
AKT基因%microRNA:RNA干扰%增殖%侵袭
AKT基因%microRNA:RNA榦擾%增殖%侵襲
AKT기인%microRNA:RNA간우%증식%침습
目的 构建靶向AKT基因的miRNA真核表达载体,观察其转染胃癌BGC-823细胞后对胃癌细胞增殖及侵袭的影响.方法 设计并合成两条针对AKT基因的特异性miRNA干扰序列,与载体pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR连接,转化大肠杆菌,纯化并鉴定后转染BGC-823细胞,实时定量PCR及Western blot技术鉴定重组体对AKT基因表达的干扰效果.使用MTT法检测细胞增殖能力,Transwell法检测细胞的侵袭能力.结果 针对AKT基因的miRNA干扰质粒构建成功,BGC-823细胞转染该质粒后AKT mRNA及AKT蛋白表达明显受抑制,细胞增殖和侵袭能力均显著下降(P均＜0.05).结论 AKT靶向miRNA真核表达载体构建成功；其可有效抑制胃癌细胞的增殖和侵袭能力.
目的 構建靶嚮AKT基因的miRNA真覈錶達載體,觀察其轉染胃癌BGC-823細胞後對胃癌細胞增殖及侵襲的影響.方法 設計併閤成兩條針對AKT基因的特異性miRNA榦擾序列,與載體pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR連接,轉化大腸桿菌,純化併鑒定後轉染BGC-823細胞,實時定量PCR及Western blot技術鑒定重組體對AKT基因錶達的榦擾效果.使用MTT法檢測細胞增殖能力,Transwell法檢測細胞的侵襲能力.結果 針對AKT基因的miRNA榦擾質粒構建成功,BGC-823細胞轉染該質粒後AKT mRNA及AKT蛋白錶達明顯受抑製,細胞增殖和侵襲能力均顯著下降(P均＜0.05).結論 AKT靶嚮miRNA真覈錶達載體構建成功；其可有效抑製胃癌細胞的增殖和侵襲能力.
목적 구건파향AKT기인적miRNA진핵표체재체,관찰기전염위암BGC-823세포후대위암세포증식급침습적영향.방법 설계병합성량조침대AKT기인적특이성miRNA간우서렬,여재체pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR련접,전화대장간균,순화병감정후전염BGC-823세포,실시정량PCR급Western blot기술감정중조체대AKT기인표체적간우효과.사용MTT법검측세포증식능력,Transwell법검측세포적침습능력.결과 침대AKT기인적miRNA간우질립구건성공,BGC-823세포전염해질립후AKT mRNA급AKT단백표체명현수억제,세포증식화침습능력균현저하강(P균＜0.05).결론 AKT파향miRNA진핵표체재체구건성공；기가유효억제위암세포적증식화침습능력.
