分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2009年
6期
897-901
,共5页
魏然飞%高秀峰%李永生%王恒%方圆
魏然飛%高秀峰%李永生%王恆%方圓
위연비%고수봉%리영생%왕항%방원
循环连续流动分析%辣根过氧化物酶%活性
循環連續流動分析%辣根過氧化物酶%活性
순배련속류동분석%랄근과양화물매%활성
基于H2O2-辣根过氧化物酶(HRP)-邻苯二胺(OPDA)催化反应体系,建立了测定游离及固定化HRP酶活性的循环连续流动分析法(CCFA).CCFA实现了反应液、反应过程的循环连续检测.用CCFA法对酶催化反应条件进行研究,得到的最佳反应条件是:pH 5.0,反应温度27 ℃, 66.0 μmol/L H2O2 , 2 mg/L OPDA,缓冲液为0.1 mol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液; 测定游离HRP的线性范围为0～10 U/L,检出限为0.21 U/L,RSD＜1.03%.使用CCFA法测定了固定化HRP的活性,并对HRP酶促动力学进行了研究,得到的游离HRP的米氏常数为0.078 mmol/L,最大反应速度为0.26 mmol/(L min),催化常数为5.2 × 104 min-1.CCFA法操作简便、准确度高、节省试剂、易于实现自动化.
基于H2O2-辣根過氧化物酶(HRP)-鄰苯二胺(OPDA)催化反應體繫,建立瞭測定遊離及固定化HRP酶活性的循環連續流動分析法(CCFA).CCFA實現瞭反應液、反應過程的循環連續檢測.用CCFA法對酶催化反應條件進行研究,得到的最佳反應條件是:pH 5.0,反應溫度27 ℃, 66.0 μmol/L H2O2 , 2 mg/L OPDA,緩遲液為0.1 mol/L檸檬痠-檸檬痠鈉緩遲液; 測定遊離HRP的線性範圍為0～10 U/L,檢齣限為0.21 U/L,RSD＜1.03%.使用CCFA法測定瞭固定化HRP的活性,併對HRP酶促動力學進行瞭研究,得到的遊離HRP的米氏常數為0.078 mmol/L,最大反應速度為0.26 mmol/(L min),催化常數為5.2 × 104 min-1.CCFA法操作簡便、準確度高、節省試劑、易于實現自動化.
기우H2O2-랄근과양화물매(HRP)-린분이알(OPDA)최화반응체계,건립료측정유리급고정화HRP매활성적순배련속류동분석법(CCFA).CCFA실현료반응액、반응과정적순배련속검측.용CCFA법대매최화반응조건진행연구,득도적최가반응조건시:pH 5.0,반응온도27 ℃, 66.0 μmol/L H2O2 , 2 mg/L OPDA,완충액위0.1 mol/L저몽산-저몽산납완충액; 측정유리HRP적선성범위위0～10 U/L,검출한위0.21 U/L,RSD＜1.03%.사용CCFA법측정료고정화HRP적활성,병대HRP매촉동역학진행료연구,득도적유리HRP적미씨상수위0.078 mmol/L,최대반응속도위0.26 mmol/(L min),최화상수위5.2 × 104 min-1.CCFA법조작간편、준학도고、절성시제、역우실현자동화.
