中外健康文摘
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중외건강문적
WORLD HEALTH DIGEST
2010年
35期
84-86
,共3页
肝细胞肝癌%Twist%小干扰%肿瘤转移
肝細胞肝癌%Twist%小榦擾%腫瘤轉移
간세포간암%Twist%소간우%종류전이
目的 探讨RNA干扰Twist基因表达对肝细胞癌细胞(HCC9402)转移的抑制作用.方法 用脂质体转染法将表达siPNA-Twist的真核表达载体pGenesil-1-Twist-siPNA(pTwist-siRNA)和空载体pGenesil-1-Neg-siRNA(pNeg-siRNA)导入HCC9402细胞,G418筛选阳性细胞,获得稳定转染的阳性克隆.观察siRNA-Twist对Twist表达的沉默及对肝细胞癌细胞体外侵袭转移的抑制作用,采用RT-PCR技术检测不同处理组细胞中Twist mRNA的表达水平,Western-blot测定蛋白表达水平.建立不同组裸鼠原位肝细胞肝癌模型,观察Twist沉默对裸鼠原位肝细胞肝癌转移的抑制作用.结果 pTwist-siRNA组胞内Twist mRNA及Twist蛋白的表达被有效沉默.重组细胞基底膜(Matrigel)侵袭实验显示,pTwist-siENA组、空白对照组、pNeg-sigNA组穿透基底膜细胞数分别为(35±10)、(219±72)、(228±71)个/高倍镜(×200),前组明显低于后两组,差异分别有统计学意义(P<0.05).裸鼠体内实验表明.pTwist-siRNA组的肿瘤转移结节、肝脏转移结节、腹水明显减少.结论 RNA干扰Twist基因表达对肝细胞肝癌细胞侵袭转移有抑制作用,Twist可能成为肝细胞肝癌基因治疗的新靶点.
目的 探討RNA榦擾Twist基因錶達對肝細胞癌細胞(HCC9402)轉移的抑製作用.方法 用脂質體轉染法將錶達siPNA-Twist的真覈錶達載體pGenesil-1-Twist-siPNA(pTwist-siRNA)和空載體pGenesil-1-Neg-siRNA(pNeg-siRNA)導入HCC9402細胞,G418篩選暘性細胞,穫得穩定轉染的暘性剋隆.觀察siRNA-Twist對Twist錶達的沉默及對肝細胞癌細胞體外侵襲轉移的抑製作用,採用RT-PCR技術檢測不同處理組細胞中Twist mRNA的錶達水平,Western-blot測定蛋白錶達水平.建立不同組裸鼠原位肝細胞肝癌模型,觀察Twist沉默對裸鼠原位肝細胞肝癌轉移的抑製作用.結果 pTwist-siRNA組胞內Twist mRNA及Twist蛋白的錶達被有效沉默.重組細胞基底膜(Matrigel)侵襲實驗顯示,pTwist-siENA組、空白對照組、pNeg-sigNA組穿透基底膜細胞數分彆為(35±10)、(219±72)、(228±71)箇/高倍鏡(×200),前組明顯低于後兩組,差異分彆有統計學意義(P<0.05).裸鼠體內實驗錶明.pTwist-siRNA組的腫瘤轉移結節、肝髒轉移結節、腹水明顯減少.結論 RNA榦擾Twist基因錶達對肝細胞肝癌細胞侵襲轉移有抑製作用,Twist可能成為肝細胞肝癌基因治療的新靶點.
목적 탐토RNA간우Twist기인표체대간세포암세포(HCC9402)전이적억제작용.방법 용지질체전염법장표체siPNA-Twist적진핵표체재체pGenesil-1-Twist-siPNA(pTwist-siRNA)화공재체pGenesil-1-Neg-siRNA(pNeg-siRNA)도입HCC9402세포,G418사선양성세포,획득은정전염적양성극륭.관찰siRNA-Twist대Twist표체적침묵급대간세포암세포체외침습전이적억제작용,채용RT-PCR기술검측불동처리조세포중Twist mRNA적표체수평,Western-blot측정단백표체수평.건립불동조라서원위간세포간암모형,관찰Twist침묵대라서원위간세포간암전이적억제작용.결과 pTwist-siRNA조포내Twist mRNA급Twist단백적표체피유효침묵.중조세포기저막(Matrigel)침습실험현시,pTwist-siENA조、공백대조조、pNeg-sigNA조천투기저막세포수분별위(35±10)、(219±72)、(228±71)개/고배경(×200),전조명현저우후량조,차이분별유통계학의의(P<0.05).라서체내실험표명.pTwist-siRNA조적종류전이결절、간장전이결절、복수명현감소.결론 RNA간우Twist기인표체대간세포간암세포침습전이유억제작용,Twist가능성위간세포간암기인치료적신파점.
