现代中西医结合杂志
現代中西醫結閤雜誌
현대중서의결합잡지
MODERN JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL CHINESE AND WESTERN MEDICINE
2009年
28期
3413-3415
,共3页
张轶庠%杨江根%张朝霞%黄东龙%黄建生
張軼庠%楊江根%張朝霞%黃東龍%黃建生
장질상%양강근%장조하%황동룡%황건생
重组质粒%CD258%肿瘤坏死因子
重組質粒%CD258%腫瘤壞死因子
중조질립%CD258%종류배사인자
目的 构建肿瘤坏死因子超家族(TNFSF)成员CD258的真核表达质粒,诱导并鉴定其表达.方法 将克隆获得的CD258全长cDNA片段插入带有报告基因的真核表达质粒pCMV-tag2B中,构建CD258的重组表达载体pCMV-t g2B-CD258,经DNA测序证明CD258的cDNA片段的插入方向和其全长cDNA的碱基顺序,用脂质体Lifefectamine2000将重组质粒转染人前列腺癌IA8细胞系,诱导其表达 g418筛选阳性克隆,用Western Blot进行鉴定.结果 pCMV-tag2B-CD258经双酶切表明有相应大小的DNA片断,序列分析证实为正确的有完整读码框的CD258基因,用脂质体转染法可将pCMV-tag2B-CD258导入IA8细胞并成功表达,目的 蛋白经Western Blot鉴定具有生物学活性.结论 重组质粒pCMV-tag2B-CD258能表达具有生物学活性的CD258蛋白,为研究CD258在前列腺癌中的功能打下了基础.
目的 構建腫瘤壞死因子超傢族(TNFSF)成員CD258的真覈錶達質粒,誘導併鑒定其錶達.方法 將剋隆穫得的CD258全長cDNA片段插入帶有報告基因的真覈錶達質粒pCMV-tag2B中,構建CD258的重組錶達載體pCMV-t g2B-CD258,經DNA測序證明CD258的cDNA片段的插入方嚮和其全長cDNA的堿基順序,用脂質體Lifefectamine2000將重組質粒轉染人前列腺癌IA8細胞繫,誘導其錶達 g418篩選暘性剋隆,用Western Blot進行鑒定.結果 pCMV-tag2B-CD258經雙酶切錶明有相應大小的DNA片斷,序列分析證實為正確的有完整讀碼框的CD258基因,用脂質體轉染法可將pCMV-tag2B-CD258導入IA8細胞併成功錶達,目的 蛋白經Western Blot鑒定具有生物學活性.結論 重組質粒pCMV-tag2B-CD258能錶達具有生物學活性的CD258蛋白,為研究CD258在前列腺癌中的功能打下瞭基礎.
목적 구건종류배사인자초가족(TNFSF)성원CD258적진핵표체질립,유도병감정기표체.방법 장극륭획득적CD258전장cDNA편단삽입대유보고기인적진핵표체질립pCMV-tag2B중,구건CD258적중조표체재체pCMV-t g2B-CD258,경DNA측서증명CD258적cDNA편단적삽입방향화기전장cDNA적감기순서,용지질체Lifefectamine2000장중조질립전염인전렬선암IA8세포계,유도기표체 g418사선양성극륭,용Western Blot진행감정.결과 pCMV-tag2B-CD258경쌍매절표명유상응대소적DNA편단,서렬분석증실위정학적유완정독마광적CD258기인,용지질체전염법가장pCMV-tag2B-CD258도입IA8세포병성공표체,목적 단백경Western Blot감정구유생물학활성.결론 중조질립pCMV-tag2B-CD258능표체구유생물학활성적CD258단백,위연구CD258재전렬선암중적공능타하료기출.
