遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2004年
6期
881-886
,共6页
金松恒%翁晓燕%王妮妍%李雪芹%毛伟华%蒋德安
金鬆恆%翁曉燕%王妮妍%李雪芹%毛偉華%蔣德安
금송항%옹효연%왕니연%리설근%모위화%장덕안
水稻%Rubisco活化酶%反义%载体构建%遗传转化
水稻%Rubisco活化酶%反義%載體構建%遺傳轉化
수도%Rubisco활화매%반의%재체구건%유전전화
利用pGEM-T easy 、pBluescript KS+获得了RCA基因两端可以引入与双元表达载体pCAMBIA1301多克隆位点相匹配的单酶切位点,将该片段连接到pCAMBIA1301载体,构建了RCA基因的反义植物表达载体pCAMR02.通过电激法将该载体导入根癌农杆菌EHA105菌株中,以根癌农杆菌介导的方法,将反义载体pCAMR02转化粳稻品种中花11,获得了抗潮霉素的再生植株,经过GUS组织化学检测和PCR鉴定结果表明,目的基因确已经整合到这些转基因水稻基因组中.表型测定显示,大部分反义水稻不能在大气CO2浓度条件下生长,存活下来转化株也是生长缓慢,植株瘦小,RCA和Rubisco含量发生了明显改变,这对研究水稻RCA与Rubisco的相互作用和调控关系具有重要意义.
利用pGEM-T easy 、pBluescript KS+穫得瞭RCA基因兩耑可以引入與雙元錶達載體pCAMBIA1301多剋隆位點相匹配的單酶切位點,將該片段連接到pCAMBIA1301載體,構建瞭RCA基因的反義植物錶達載體pCAMR02.通過電激法將該載體導入根癌農桿菌EHA105菌株中,以根癌農桿菌介導的方法,將反義載體pCAMR02轉化粳稻品種中花11,穫得瞭抗潮黴素的再生植株,經過GUS組織化學檢測和PCR鑒定結果錶明,目的基因確已經整閤到這些轉基因水稻基因組中.錶型測定顯示,大部分反義水稻不能在大氣CO2濃度條件下生長,存活下來轉化株也是生長緩慢,植株瘦小,RCA和Rubisco含量髮生瞭明顯改變,這對研究水稻RCA與Rubisco的相互作用和調控關繫具有重要意義.
이용pGEM-T easy 、pBluescript KS+획득료RCA기인량단가이인입여쌍원표체재체pCAMBIA1301다극륭위점상필배적단매절위점,장해편단련접도pCAMBIA1301재체,구건료RCA기인적반의식물표체재체pCAMR02.통과전격법장해재체도입근암농간균EHA105균주중,이근암농간균개도적방법,장반의재체pCAMR02전화갱도품충중화11,획득료항조매소적재생식주,경과GUS조직화학검측화PCR감정결과표명,목적기인학이경정합도저사전기인수도기인조중.표형측정현시,대부분반의수도불능재대기CO2농도조건하생장,존활하래전화주야시생장완만,식주수소,RCA화Rubisco함량발생료명현개변,저대연구수도RCA여Rubisco적상호작용화조공관계구유중요의의.
