遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2009年
7期
719-724
,共6页
刘海峰%张煦%李明洲%李学伟
劉海峰%張煦%李明洲%李學偉
류해봉%장후%리명주%리학위
罗格列酮%脂肪形成%脂肪前体细胞%基因表达%猪
囉格列酮%脂肪形成%脂肪前體細胞%基因錶達%豬
라격렬동%지방형성%지방전체세포%기인표체%저
为了解罗格列酮对猪脂肪前体细胞诱导分化过程的影响,利用胶原酶消化法分离猪皮下脂肪前体细胞,采用含50 nmol/L胰岛素、100 nmol/L地塞米松及0.25 mmol/L 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤的分化培养液Ⅰ(对照组)和在分化培养液Ⅰ中添加100 nmol/L罗格列酮的分化培养液Ⅱ(实验组)两种诱导分化方法对脂肪前体细胞进行诱导分化,借助实时定量RT-PCR方法检测了细胞分化过程中聚脂相关基因的表达.结果显示:罗格列酮对PPARγ、C/EBPα、FABP4、FASN和GPAT基因的表达有显著的上调作用,而对PPARα有一定的下调作用.试验组中PPARα、PPARγ、C/EBPα,FABP4、FASN和GPAT等基因分别于48 h、48 h、48 h、108 h,60 h和24 h达到表达高峰,此时的表达量分别是诱导前的1.7、48、3.3、487.5、5.8和3.6倍,GPAT同PPARa和FASN基因表达量间均达到显著相关(P<0.05);而对照组中PPARα、PPARγ、C/EBPα,FABP4,FASN和GPAT等基因分别于84 h、96 h、48 h、96 h,36 h和36 h达到表达高峰,此时的表达量分别是诱导前的2.1、11、1.6、216.5、3.5和2.8倍,GPAT同PPARα和FASN基因表达量间均达到极显著相关(P<0.01).本实验结果表明:罗格列酮不仅可以极大的促进PPARy和C/EBPα基因的表达,还能让其协同达到表达高峰:PPARγ和C/EBPα可能是调控猪脂肪前体细胞分化的关键转录因子;在脂肪形成过程中,甘油脂类的生物合成可能发生较早,同时PPARa可能主要参与甘油脂类生物合成的调控.
為瞭解囉格列酮對豬脂肪前體細胞誘導分化過程的影響,利用膠原酶消化法分離豬皮下脂肪前體細胞,採用含50 nmol/L胰島素、100 nmol/L地塞米鬆及0.25 mmol/L 3-異丁基-1-甲基黃嘌呤的分化培養液Ⅰ(對照組)和在分化培養液Ⅰ中添加100 nmol/L囉格列酮的分化培養液Ⅱ(實驗組)兩種誘導分化方法對脂肪前體細胞進行誘導分化,藉助實時定量RT-PCR方法檢測瞭細胞分化過程中聚脂相關基因的錶達.結果顯示:囉格列酮對PPARγ、C/EBPα、FABP4、FASN和GPAT基因的錶達有顯著的上調作用,而對PPARα有一定的下調作用.試驗組中PPARα、PPARγ、C/EBPα,FABP4、FASN和GPAT等基因分彆于48 h、48 h、48 h、108 h,60 h和24 h達到錶達高峰,此時的錶達量分彆是誘導前的1.7、48、3.3、487.5、5.8和3.6倍,GPAT同PPARa和FASN基因錶達量間均達到顯著相關(P<0.05);而對照組中PPARα、PPARγ、C/EBPα,FABP4,FASN和GPAT等基因分彆于84 h、96 h、48 h、96 h,36 h和36 h達到錶達高峰,此時的錶達量分彆是誘導前的2.1、11、1.6、216.5、3.5和2.8倍,GPAT同PPARα和FASN基因錶達量間均達到極顯著相關(P<0.01).本實驗結果錶明:囉格列酮不僅可以極大的促進PPARy和C/EBPα基因的錶達,還能讓其協同達到錶達高峰:PPARγ和C/EBPα可能是調控豬脂肪前體細胞分化的關鍵轉錄因子;在脂肪形成過程中,甘油脂類的生物閤成可能髮生較早,同時PPARa可能主要參與甘油脂類生物閤成的調控.
위료해라격렬동대저지방전체세포유도분화과정적영향,이용효원매소화법분리저피하지방전체세포,채용함50 nmol/L이도소、100 nmol/L지새미송급0.25 mmol/L 3-이정기-1-갑기황표령적분화배양액Ⅰ(대조조)화재분화배양액Ⅰ중첨가100 nmol/L라격렬동적분화배양액Ⅱ(실험조)량충유도분화방법대지방전체세포진행유도분화,차조실시정량RT-PCR방법검측료세포분화과정중취지상관기인적표체.결과현시:라격렬동대PPARγ、C/EBPα、FABP4、FASN화GPAT기인적표체유현저적상조작용,이대PPARα유일정적하조작용.시험조중PPARα、PPARγ、C/EBPα,FABP4、FASN화GPAT등기인분별우48 h、48 h、48 h、108 h,60 h화24 h체도표체고봉,차시적표체량분별시유도전적1.7、48、3.3、487.5、5.8화3.6배,GPAT동PPARa화FASN기인표체량간균체도현저상관(P<0.05);이대조조중PPARα、PPARγ、C/EBPα,FABP4,FASN화GPAT등기인분별우84 h、96 h、48 h、96 h,36 h화36 h체도표체고봉,차시적표체량분별시유도전적2.1、11、1.6、216.5、3.5화2.8배,GPAT동PPARα화FASN기인표체량간균체도겁현저상관(P<0.01).본실험결과표명:라격렬동불부가이겁대적촉진PPARy화C/EBPα기인적표체,환능양기협동체도표체고봉:PPARγ화C/EBPα가능시조공저지방전체세포분화적관건전록인자;재지방형성과정중,감유지류적생물합성가능발생교조,동시PPARa가능주요삼여감유지류생물합성적조공.