分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2008年
7期
900-904
,共5页
张兰威%陈一%韩雪%杜明%易华西
張蘭威%陳一%韓雪%杜明%易華西
장란위%진일%한설%두명%역화서
双水相%蛋白酶%风干香肠%分离提取
雙水相%蛋白酶%風榦香腸%分離提取
쌍수상%단백매%풍간향장%분리제취
双水相萃取(ATPS)是近年来发展起来的蛋白纯化方法.为了扩展该方法适应领域,同时为风干香肠形成过程酶系的研究提供具体方法.本实验研究了运用双水相技术分离提取风干香肠中蛋白酶,对构成双水相体系中的PEG分子量、浓度和类型以及盐浓度的影响进行了分析.确定了双水相组成体系为20% PEG1000(m/m)和25% MgSO4(m/m),在此体系中风干香肠的蛋白酶主要分布在上相,最高酶活12.37 U/μg;纯化倍数为4.61;回收率为85%.通过分子筛层析对比,表明风干香肠经过双水相分离提取杂蛋白峰被除去,而蛋白酶峰几乎未受到影响,说明该双水相体系萃取香肠中蛋白酶具有良好的专一性.调解双水相pH值对蛋白酶的萃取没有影响,而添加电解质NaCl反而产生不利影响.
雙水相萃取(ATPS)是近年來髮展起來的蛋白純化方法.為瞭擴展該方法適應領域,同時為風榦香腸形成過程酶繫的研究提供具體方法.本實驗研究瞭運用雙水相技術分離提取風榦香腸中蛋白酶,對構成雙水相體繫中的PEG分子量、濃度和類型以及鹽濃度的影響進行瞭分析.確定瞭雙水相組成體繫為20% PEG1000(m/m)和25% MgSO4(m/m),在此體繫中風榦香腸的蛋白酶主要分佈在上相,最高酶活12.37 U/μg;純化倍數為4.61;迴收率為85%.通過分子篩層析對比,錶明風榦香腸經過雙水相分離提取雜蛋白峰被除去,而蛋白酶峰幾乎未受到影響,說明該雙水相體繫萃取香腸中蛋白酶具有良好的專一性.調解雙水相pH值對蛋白酶的萃取沒有影響,而添加電解質NaCl反而產生不利影響.
쌍수상췌취(ATPS)시근년래발전기래적단백순화방법.위료확전해방법괄응영역,동시위풍간향장형성과정매계적연구제공구체방법.본실험연구료운용쌍수상기술분리제취풍간향장중단백매,대구성쌍수상체계중적PEG분자량、농도화류형이급염농도적영향진행료분석.학정료쌍수상조성체계위20% PEG1000(m/m)화25% MgSO4(m/m),재차체계중풍간향장적단백매주요분포재상상,최고매활12.37 U/μg;순화배수위4.61;회수솔위85%.통과분자사층석대비,표명풍간향장경과쌍수상분리제취잡단백봉피제거,이단백매봉궤호미수도영향,설명해쌍수상체계췌취향장중단백매구유량호적전일성.조해쌍수상pH치대단백매적췌취몰유영향,이첨가전해질NaCl반이산생불리영향.